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2017 Fiscal Year Research-status Report

幹細胞の分化制御を指向した高架橋コラーゲン・スキャフォールドの開発

Research Project

Project/Area Number 15K15704
Research InstitutionNiigata University

Principal Investigator

加来 賢  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (30547542)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2019-03-31
Keywordsコラーゲン架橋
Outline of Annual Research Achievements

本研究は細胞移植の際に使用するコラーゲン・スキャフォールドの架橋制御が、材料の機械的強度を変化させるだけでなく、間葉系幹細胞の骨芽細胞分化を促進し得る可能性を有しているとの仮説から、架橋を変化させたコラーゲン・スキャフォールドを用いて幹細胞
の分化制御を行い、細胞移植を併用した骨再生の場において有効な機能性スキャフォールドの開発、さらにその制御機構の一端を明らかにしようとする試みである.
骨芽細胞株(MC3T3-E1)を架橋阻害剤(BAPN:beta-aminopropionitrile)存在下で培養し、架橋の異なるマトリックスを作製した。架橋阻害剤の濃度は細胞増殖およびコラーゲンの産生に影響を及ぼさずに架橋を阻害する至適濃度を設定することに成功した。Sodium deoxycholateを用いて細胞成分のみを取り除いてマトリックスのみを精製した後、マウス大腿骨骨髄由来間質細胞を播種し、その挙動を解析した。細胞の初期接着、細胞増殖Alkaline Phosphatase活性ならびに骨芽細胞関連遺伝子の発現は低架橋マトリックスにおいて亢進した。動物実験では4週齢のB57BL/6マウスを0.1%または0.25%のBAPNを含有する飼料にて8週間飼育した。脛骨の骨基質から抽出したコラーゲン中のクロスリンク解析から、約40%のクロスリンクの低下が認められた。BAPNの直接的な影響を排除するため、飼料を通常のものに戻した後、0,2,4週後のサンプルから組織標本を作製し骨芽細胞および破骨細胞の活性を観察した。通常飼料に戻した後、4週後のサンプルでは骨芽細胞の活性が上昇したが、破骨細胞活性に変化は認められなかった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

低架橋マトリックスが骨芽細胞分化に及ぼす影響を培養系ならびに動物実験を用いて解析した。

Strategy for Future Research Activity

低架橋マトリックスが骨芽細胞分化を促進するメカニズムを明らかにするため、細胞表面に存在するコラーゲン受容体の機能を中心に解析を行う。

Causes of Carryover

組織解析経費が予定よりも少額で終了したため、低架橋マトリックスが骨芽細胞分化を促進する作用機序を明らかにするための経費として次年度繰越分とした。

  • Research Products

    (5 results)

All 2018 2017 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (4 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 3 results)

  • [Int'l Joint Research] University of North Carolina/University of Texas at Houston(米国)

    • Country Name
      U.S.A.
    • Counterpart Institution
      University of North Carolina/University of Texas at Houston
  • [Journal Article] BRCA1 and BRCA2 tumor suppressors in neural crest cells are essential for craniofacial bone development2018

    • Author(s)
      Kitami Kohei、Kitami Megumi、Kaku Masaru、Wang Bin、Komatsu Yoshihiro
    • Journal Title

      PLOS Genetics

      Volume: 14 Pages: e1007340

    • DOI

      10.1371/journal.pgen.1007340

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] An ENU-induced splice site mutation of mouse Col1a1 causing recessive osteogenesis imperfecta and revealing a novel splicing rescue2017

    • Author(s)
      Tabeta Koichi、Du Xin、Arimatsu Kei、Yokoji Mai、Takahashi Naoki、Amizuka Norio、Hasegawa Tomoka、Crozat Karine、Maekawa Tomoki、Miyauchi Sayuri、Matsuda Yumi、Ida Takako、Kaku Masaru、Hoebe Kasper、Ohno Kinji、Yoshie Hiromasa、Yamazaki Kazuhisa、Moresco Eva Marie Y.、Beutler Bruce
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Pages: 11717

    • DOI

      10.1038/s41598-017-10343-9

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Functional Diversity of Ciliary Proteins in Bone Development and Disease2017

    • Author(s)
      Kaku Masaru、Komatsu Yoshihiro
    • Journal Title

      Current Osteoporosis Reports

      Volume: 15 Pages: 96~102

    • DOI

      10.1007/s11914-017-0351-6

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] A paradigm shift for bone quality in dentistry: A literature review.2017

    • Author(s)
      Kuroshima Shinichiro, Kaku Masaru, Ishimoto Takuya Sasaki Muneteru, Nakano Takayoshi, Sawase Takashi
    • Journal Title

      Journal of Prosthodontic Research

      Volume: 61 Pages: 353-362

    • DOI

      org/10.1016/j.jpor.2017.05.006

    • Peer Reviewed / Open Access

URL: 

Published: 2018-12-17   Modified: 2022-02-21  

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