2017 Fiscal Year Research-status Report
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15K16328
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
相内 章 国立感染症研究所, 感染病理部, 主任研究官 (10572133)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 抗体 / B細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
抗体は液性免疫を担うタンパク質であり、異物に対して特異的に誘導される。近年、抗体を治療に用いる抗体医薬が注目されているが、その多くは癌や自己免疫疾患を標的としており、感染症を対象とする抗体医薬の開発は遅れている。抗体医薬に用いられる抗体は完全ヒト抗体が望ましく、すでに樹立された抗原特異的なマウス抗体のヒト化、ヒト抗体Fab断片発現ファージディスプレイライブラリーから選択した抗原特異的Fab断片のヒトIgG抗体定常領域への接合、あるいはヒト抗体発現トランスジェニックマウスを利用することで、作製されている。近年、ヒト末梢血から単離した抗原特異的抗体を産生する単一B細胞からシングルセルPCRにより抗体遺伝子をクローニングし完全ヒト抗体を作製する技術も確立されている。
ヒト末梢血に存在する単一B細胞から抗体遺伝子をクローニングする際には、シングルセルPCRの精度が課題として残されている。一過性に細胞を増殖させた上で抗体遺伝子をクローニングすることで、この問題は大きく改善できると考えられる。また、抗原に対する特異的抗体を発現するB細胞の選択方法をより簡便化できれば、抗原特異的抗体遺伝子のクローニングがより容易になると考えられる。
すでに、ODN2006を主として他4種類の増殖因子を添加することで、一過性にヒトB細胞を増殖させるための最適条件を決定している。しかしながら、パンニング法による抗原特異的な抗体発現B細胞の選択条件の最適化に苦慮している。引き続き、条件の検討を行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
前年度に条件検討を行い最適化を行ったヒトB細胞を一過性に増殖させる条件をもとに、抗原に対して特異的な抗体を発現するB細胞をパンニングにより選択する条件を検討している。しかしながら、その条件設定の決定に苦慮しており、当初の計画より遅延している。
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| Strategy for Future Research Activity |
既に決定したヒトB細胞の一過性増殖条件下において、抗原特異的抗体を発現する単一B細胞の選択法に関して条件検討を行っているが、至適条件の設定に苦慮している。この原因として、そもそも末梢血中に存在し膜表面に特異的抗体を発現している記憶B細胞が少ないこと、あるいは標的抗原として選択したインフルエンザウイルスが適切でなかった可能性が考えられる。
今年度は、標的抗原を臨機応変に変更するなどしながら条件検討を継続し、選択されたヒトB細胞から抗体遺伝子をクローニングした上で組換えヒト抗体として発現し、その抗体の評価を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
（理由）年度末納品等にかかる支払いが平成30年4月1日以降となったため、当該支出分については次年度の実支出額に計上予定。
（使用計画）上記のとおり。
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