2015 Fiscal Year Research-status Report
オリゴデンドロサイトにおける統合失調症関連因子DBZの機能解析
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15K18381
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| Research Institution | Kinki University |
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Principal Investigator |
清水 尚子 近畿大学, 東洋医学研究所, 助教 (50572731)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | オリゴデンドロサイト / 統合失調症 / DISC1 / DBZ / ミエリン形成 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、i) 統合失調症関連因子DISC1の新規結合因子DBZ (DISC1-binding Zinc finger protein) が髄鞘形成時期のオリゴデンドロサイト（OLs）に発現していること、ii) DBZはOLsの分化を正に制御する機能を持つこと、という申請者がこれまでに行ってきた検討結果をさらに発展させて、DBZによるOLs特異的な遺伝子発現制御機構の解明およびOLs特異的なDBZ結合因子の同定・機能解析を行うことにより、OLs成熟化機構におけるDBZの詳細な役割を解明し、OLsの機能異常を起源とする統合失調症発症の分子機序の解明へと展開するための基盤形成の確立が目的である。
平成27年度は、まずはDBZがどのようなOLs分化制御機構を介して分化を正に制御し得るのか否かを検討するために、DBZ発現抑制により影響を受ける因子群の同定のため、マイクロアレイ解析を行った。その結果、細胞骨格系の因子を多く含むいくつかの遺伝子がDBZ KO マウスで変動している可能性が示唆されたため、定量的リアルタイムPCR法により実際に発現変動する標的因子の絞り込みを行っている。
また、OLs特異的なDBZの新規結合因子を同定するため、N2a細胞を用いて免疫沈降法および質量分析により候補因子の探索を行っている。さらにこれまでの神経細胞での検討から、OLsにおけるDBZの相互作用候補因子としてNde1/NdeL1に注目し、検討を進めた。その結果、DBZとNde1/NdeL1との相互作用を確認出来たので、他の候補因子を含めて相互作用の有無を検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成28年度にOLsのDBZの機能解析を進める上で重要な、DBZ KOマウスの維持も順調である。平成27年度は、OLs成熟化におけるDBZの詳細な機能解析を行うために、まずはDBZによる遺伝子発現調節機構への関与の検討を開始し、変動候補因子の絞り込み中である。また、OLs特異的DBZ相互作用因子の探索を行い、候補因子を複数個見出している。さらには、OLsにおいてDBZと相互作用する因子としてNde1/NdeL1を確認している。これらは、初年度の当初計画にほぼ沿った内容に関する成果であり、平成28年度以降に計画に沿ってさらに詳細な解析を行う予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成28年度は、これまでの研究成果を元に更に詳細にOLsにおけるDBZの機能解析を行う。
まず、DBZによる遺伝子発現調節に関わる因子の同定とOLs成熟化との関連性の検討について、OLsの分化促進又は抑制に関わる因子群の発現変化の有無を指標にrealtime-PCR法やWestern blotting法などで検討する。
さらには、OLsにおけるDBZとの相互作用因子の絞り込みと機能解析を行う。既に相互作用を確認しているNde1については、OLs成熟化に関連している細胞内の微小管輸送との関連性を免疫染色法やIn situ hybridization法、realtime-PCR法、Western blotting法などで検討する。
疾患との関連で、DBZ KOマウスのストレス脆弱性の有無と統合失調症発症との関連性について、環境ストレス負荷を行った後の脳白質の構造変化について免疫組織化学的検討及び電子顕微鏡を用いた微細構造変化の検討を行う。
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Research Products
(4 results)
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[Journal Article] Association between chronic stress-induced structural abnormalities in Ranvier nodes and reduced oligodendrocyte activity in major depression.2016
Author(s)
Miyata S, Taniguchi M, Koyama Y, Shimizu S, Tanaka T, Yasuno F, Yamamoto A, Iida H, Kudo T, Katayama T, Tohyama M.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 6
Pages: 23084
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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