2016 Fiscal Year Annual Research Report
Novel histone chaperone GRWD1 inhibits p53 and promotes tumorigenesis
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15K18412
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
杉本 のぞみ 九州大学, 薬学研究院, 助教 (00633108)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | GRWD1 / p53 / RPL11 / MDM2 / 発がん / p53反応性プロモーター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
GRWD1はDNA複製だけでなく、細胞周期を統合的に制御していると考えられる新規ヒストンシャペロンである。このGRWD1の結合因子として、核小体因子RPL11を同定した。RPL11は、低用量アクチノマイシンD処理や低栄養状態時に核小体が崩壊すると核へ放出され、ユビキチンリガーゼMDM2に結合することでその機能を抑制し、腫瘍抑制因子p53の安定化を誘導することが知られている。解析の結果、GRWD1はRPL11と直接結合することで、RPL11-MDM2結合を競合的に阻害し、核小体ストレス時のp53誘導に抑制的に働き、その結果、発がんに関与することを発見した。これらの知見と一致して、GRWD1の過剰発現はp53が野生型のグリオーマ患者において予後不良と強く相関していたが、変異p53を持つ同患者では、そのような相関は認められなかった。
加えて、以下に示すようにGRWD1がp53と結合し、その結果、p53の転写活性化能を抑制している可能性も見出した。まずHCT116細胞においてGRWD1を発現抑制した後、ブレオマイシン処理によってDNAに損傷を与えた。その結果、GRWD1発現抑制細胞では、コントロールと比較してp53標的因子の一つであるp21の発現量の上昇がタンパク質レベルおよびmRNAレベルで観察された。さらに、p21遺伝子のプロモーター領域を組み込んだレポータープラスミドを用いたルシフェラーゼアッセイによって、GRWD1がp53による転写活性化に抑制的に作用することが示唆された。また、ChIP-qPCR法により、GRWD1がp21プロモーターに結合していることも示唆された。今後は、GRWD1がp21プロモーター上でどのようにp53転写活性化能を抑制しているのかをChIP-qPCR法などによって解析する予定である。
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Research Products
(7 results)
