2016 Fiscal Year Research-status Report
てんかんモデルラットの海馬に生じる異所性顆粒細胞の形成機序に関する病理学的研究
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15K18781
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
櫻井 優 山口大学, 共同獣医学部, 助教 (00747967)
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2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | てんかん / 神経新生 / アポトーシス / 神経病理 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
てんかんはの脳の神経細胞の過剰な興奮により、発作を繰り返す慢性の脳疾患である。てんかん発作は海馬歯状回の神経新生を活性化させることが知られている。このてんかん発作による神経新生の活性化には、異所性顆粒細胞の形成に代表される異常が伴ない、その結果、異常な神経回路を形成することがてんかんの発症や病態の悪化につながると考えられている。一方で、異常な神経新生により生じる新生細胞の多くはアポトーシスにより死滅すると考えられており、異所性顆粒細胞にはアポトーシスを回避する機構が存在すると思われる。本年度は、ピロカルピン投与てんかんモデルラットを用いて、アポトーシス抑制タンパク質の１つであるSurvivinの発現を検討した。発作誘発後7日間BrdUを投与し新生細胞を標識したラットを、発作誘発7日後および14日後に脳を採材し、免疫組織化学的検索を行った7日群、14日群共に活発な神経新生新生が認められる一方で、新生細胞数は7日群に比べ、14日群で有意に減数していた。また、海馬には核濃縮を示す細胞やアポトーシスの指標となるssDNAおよびCleaved caspase-3に陽性を示す細胞が散見され、アポトーシスが生じていることが示唆された。Survivinの発現海は馬の顆粒細胞に広く見られ、またDoublecortinに陽性を示す未熟な神経細胞の一部にも認められた。加えて、海馬門部に存在しCalbindinに陽性を示す異所性顆粒細胞においてもSurvivinの発現が認められた。以上の結果から、Survivnを発現することでアポトーシスを回避することが異所性顆粒細胞の形成に関与しうると考えている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
てんかんモデルラットの発作誘発後にBrdUを7日間投与することでこの期間の新生細胞を標識した。BrdU陽性新生細胞の数は発作誘発7日後から14日後にかけてで減数しており、新生細胞が死滅していることが示唆された。加えて、核濃縮を示す細胞やアポトーシスの指標となるssDNAおよびCleaved caspase-3に陽性を示す細胞が散見されたことからアポトーシスによる細胞死が生じていると考えられた。一方で、アポトーシスを抑制するSurvivinの発現が未熟な神経細胞の一部（Doublecortin陽性）および異所性顆粒細胞（Calbindin陽性、海馬門部に分布）に見られた。Survivinの発現がてんかん発作による異常な神経新生におけるアポトーシス回避機構であり、異所性顆粒細胞の形成に関わることが考えられた。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、Survivinの発現機序について検討を進めたい。てんかんの海馬ではグリア細胞（ミクログリア、アストログリアなど）の活性化が生じることが知られており、グリア細胞が活発な神経新生に関与することが考えられる。グリア細胞の活性阻害剤などを用いることでSurvivnの発現の変化を検討する。
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[Journal Article] Establishment of a Novel Model for Anticancer Drug Resistance in Three-Dimensional Primary Culture of Tumor Microenvironment2016
Author(s)
Tatsuya Usui, Masashi Sakurai, Shuhei Enjoji, Hideyoshi Kawasaki, Koji Umata, Takashi Ohama, Nobuyuki Fujiwara, Ryotaro Yabe, Shunya Tsuji, Hideyuki Yamawaki, Shoichi Hazama, Hiroko Takenouchi, Masao Nakajima, Ryouichi Tsunedomi, Nobuaki Suzuki, Hiroaki Nagano, Koichi Sato
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Journal Title
Stem Cells International
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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