2016 Fiscal Year Research-status Report
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15K18803
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Research Institution | Akita University |
Principal Investigator |
関 信輔 秋田大学, バイオサイエンス教育・研究サポートセンター, 助教 (60749167)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | 幹細胞移植 / インユーテロ法 |
Outline of Annual Research Achievements |
臓器不全症の治療には臓器移植が有効であるが、ドナー不足や免疫拒絶などの問題を解決できていないのが現状である。移植可能な臓器を患者自身のIPS細胞から作出することは再生医療における重要な目標である。 先行研究により、臓器欠損動物の胚盤胞に正常多能性幹細胞を注入し、動物体内に膵臓・腎臓などを作出することに成功している。しかしながら、この方法では、ヒト細胞が動物の神経や生殖腺に寄与してしまうことを懸念する倫理的問題のため、ヒト臓器作出研究を開始するにも様々な審議が必要なのが現状である。 研究代表者は、メダカにおいて、生殖幹細胞(精原細胞)を異系統のメダカに移植することで、移植幹細胞由来の精子・卵子を生産する生殖巣を生産することに成功した。上記倫理的問題を回避するためにも。哺乳類において、臓器欠損動物胎仔に分化運命の決定している臓器前駆細胞を移植することで、動物体内に臓器を作出する方法を開発する。 昨年度までに、マウス胎仔へ細胞を移植し、一部の移植細胞が増殖・分化させることに成功した。 次の実験としては、臓器を欠損したマウス胎仔を用意する必要がある。そこで、今年度は、ゲノム編集(CRISPR/Cas9システム)により、ノックアウトマウスを高効率で作出するための技術開発を行った。メラニン色素の生合成に関与するチロシナーゼ遺伝子のノックアウトを試みたところ、F0世代で8-10割のノックアウトマウスを作出することに成功した。この研究成果については、秋田医学に掲載予定である。今年度の技術開発により、高効率でノックアウトマウスを用意することが可能になった。 平成29年度は、臓器欠損マウス胎仔に膵前駆細胞を移植することで、膵臓を異系統体内で作出することが可能かどうかを検証する予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
昨年度までに、マウス胎仔へ細胞を移植し、一部の移植細胞が増殖・分化させることに成功した。 次の実験としては、臓器を欠損したマウス胎仔を用意する必要がある。そこで、今年度は、ゲノム編集(CRISPR/Cas9システム)により、ノックアウトマウスを高効率で作出するための技術開発を行った。メラニン色素の生合成に関与するチロシナーゼ遺伝子のノックアウトを試みたところ、F0世代で8-10割のノックアウトマウスを作出することに成功した。この研究成果については、秋田医学に掲載予定である。今年度の技術開発により、高効率でノックアウトマウスを用意することが可能になった。以上のように、研究をすすめるために必要な技術開発に成功したため。
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Strategy for Future Research Activity |
初年度の研究により、マウス胎仔へ臓器前駆細胞を移植することが可能になった。本研究は、異種体内での臓器作出を最終目的に研究をすすめているが、移植を行うマウス胎仔には臓器欠損マウスを用いる必要がある。ゲノム編集を用いることで高効率で臓器欠損マウスを用意することが可能になった。今後は、臓器欠損マウス胎仔に膵前駆細胞(GFP)を移植することで、移植細胞由来の膵臓を異系統体内で作出することが可能かどうかを検証する予定である。
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Causes of Carryover |
1174円という少額の予算が残り、試薬等の購入も容易ではないため。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
今年度の予算と合わせて使用させて頂きたい。
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Remarks |
メダカにおける凍結生殖幹細胞移植による精巣・卵巣を生産したのちに、次世代を生産することに成功した。そのことについてプレスリリースを行った。
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[Journal Article] Intracellular ice formation in mouse zygotes and early morulae vs. cooling rates and temperature-experimental vs. theory2016
Author(s)
Jin B, Seki S, Paredes E, Qiu J, Shi Y, Zhang Z, Ma C, Jiang S, Li J, Yuan F, Wang S, Shao X, Mazur P
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Journal Title
Cryobiology
Volume: 73
Pages: 181-186
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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