2016 Fiscal Year Annual Research Report
Study of the host factor important for secondary envelopment of HSV-1
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15K19108
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science |
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Principal Investigator |
小林 郷介 公益財団法人東京都医学総合研究所, ゲノム医科学研究分野, 主任研究員 (80644989)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ウイルス学 / ヘルペスウイルス / ゴルジ体 / Rho GTPase / miRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度に絞り込んだmiR-199a-5pおよびmiR-199a-3pの標的候補分子の中から、単純ヘルペスウイルス1型（HSV-1）の２次エンベロープ形成に関わる宿主因子としてARHGAP21に着目した。この分子は両miRNAの標的であることが3'UTRレポーターアッセイによって明らかになり、この分子をノックダウンすることで２次エンベロープ形成効率が減弱することが電子顕微鏡解析から明らかになった。
ARHGAP21はゴルジ体特異的なCdc42のGTPase activating protein (GAP)であることが明らかとなっており、HSV-1がゴルジ体のトランス槽で2次エンベロープを獲得することとの関連が疑われた。恒常活性化型のCdc42を強制発現させるとHSV-1の２次エンベロープ形成効率が減弱したことから、ARHGAP21によるゴルジ体におけるCdc42の活性制御がHSV-1の2次エンベロープ形成に重要な役割を果たしていることが強く示唆された。また、ゴルジ体のトランス、メディアル、シス各槽の特異的マーカーの発現量をウエスタンブロッティングによって調べると、ARHGAP21ノックダウンやpre-miR-199a強制発現下でHSV-1を感染させたときのみトランスマーカーが特異的に減少していたため、ARHGAP21はHSV-1感染時にゴルジ体のトランス槽を維持することでHSV-1の2次エンベロープに寄与している可能性が明らかになった。
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Research Products
(2 results)
