2016 Fiscal Year Research-status Report
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15K19126
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
中濱 泰祐 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (10636187)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | RNA編集酵素 / 自己免疫疾患 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成27年度の解析から、未分化T細胞を抗CD3/CD28抗体で刺激すると、ADAR2の発現レベルが著しく上昇することを見出した。このため、平成28年度は、①抗CD3/CD28抗体刺激によるT細胞活性化や②Th1やTh17細胞への分化にADAR2が関与しているかどうかを明らかにするため、以下の２つの研究計画を実施した。
1.「T細胞活性化及び分化におけるADAR2の役割の解明」T細胞特異的ADAR2欠損マウス由来未分化T細胞を抗CD3/CD28抗体で刺激し、細胞増殖、IL2、IFNγ産生などについて、野生型との差異を比較した。その結果、細胞増殖やIL2産生は野生型と同程度であったが、IFNγ産生が著しく亢進していることを見出した。さらに、未分化T細胞にTh1あるいはTh17細胞分化誘導刺激を添加したところ、ADAR2欠損細胞においてTh1細胞への分化亢進が認められた。一方で、Th17細胞への分化率は野生型と同程度であった。以上から、ADAR2がTh1細胞の分化抑制に寄与していることが明らかとなった。
2.「RNA編集活性の必要性の検証」1.の結果から、ADAR2を欠損するとTh1細胞への分化が亢進することが明らかとなった。この機能がRNA編集活性に依存するものであるかどうかを調べるため、ADAR2欠損未分化T細胞に、野生型あるいはRNA編集活性欠損型ADAR2コンストラクトを導入し、抗CD3/CD28抗体で刺激した。その結果、RNA編集活性欠損型ADAR2によっても、Th1細胞への分化が抑制された。以上から、ADAR2がRNA編集活性非依存的にTh1細胞への分化抑制に働いていることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成28年度は、ADAR2欠損未分化T細胞を用いて、①抗CD3/CD28抗体刺激によるT細胞活性化や②Th1やTh17細胞への分化にADAR2が関与しているかどうかを検証した。その結果、ADAR2欠損未分化T細胞を抗CD3/CD28抗体で刺激すると、IFNγ産生が著しく亢進することが明らかとなった。また、分化誘導実験においては、ADAR2欠損時にTh1細胞への分化亢進が認められたが、一方で、Th17細胞への分化率は野生型と同程度であった。当初予想していたTh17細胞分化に対するADAR2の関与は認められなかったが、Th1細胞への分化抑制にADAR2が寄与しているとの結果を得ることができた。このため、概ね順調に進展していると評価する。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成29年度は、以下の２つの計画を実施する。
1. 「ADAR2によるIFNγ産生抑制機構の解明」近年、ADAR2のRNA編集非依存的機能の一つとして、標的RNAの安定化機構が報告されている。このため、既知のIFNγ制御因子などを中心に、それらのRNAの安定性をADAR2が特異的に制御しているかどうかを検証する。
2. 「自己免疫疾患におけるADAR2の役割の解明」T細胞特異的ADAR2欠損マウスに、実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)やデキストラン硫酸ナトリウム誘発性腸炎(DSS-induced colitis)を誘導し、症状やT細胞の分化などについて野生型マウスとの差異を比較する。以上から、T細胞に発現するADAR2の自己免疫疾患における意義を明らかにする。
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