赤血球関連コレステロール代謝のメカニズムとその破綻の解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K19174
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 大川 龍之介 東京医科歯科大学, 大学院保健衛生学研究科, 助教 (50420203)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 赤血球 / コレステロール

Outline of Annual Research Achievements

赤血球関連コレステロール代謝機構を調べるために，以下の検討を行った．
1．赤血球からのコレステロール放出のアクセプター同定および放出機構の解析
（1）洗浄赤血球にアポリポタンパクA-I，アポリポタンパクA-II，精製したアポリポタンパクEを豊富に含むHDLおよびアポリポタンパクE非含有HDLを添加，インキュベーションし，コレステロール濃度を測定した．結果，HDLとは大きく異なり，アポリポタンパクA-I，A-IIではほとんど赤血球からのコレステロールの放出は認められなかった．また，アポリポタンパクEの有無ではコレステロールの放出に差がないことが明らかになった．よって，赤血球からのコレステロール放出には，上記以外のアポリポタンパク，脂質転送酵素，あるいは，リン脂質などのHDLに含まれる脂質が関与している可能性が示唆された．（2）アデニン，オルトバナジン（V）酸ナトリウム，グリブライド（ABCA1阻害剤）を用いた検討により，この放出には，少なくともATPを必要とするトランスポーターが関与していることが示唆された．
2．赤血球のコレステロール逆転送機構への関与の解析
赤血球によるコレステロール逆転送への関与を調べるために，初めに，トリチウム標識コレステロールを用いた泡沫細胞からのコレステロールエフラックス能の測定系を確立した（投稿中）．次に，確立した測定条件を用いて，アポリポプロテインA-IおよびHDLによるコレステロールエフラックスの際に，赤血球も混在させ，その関与を調べた．その結果，赤血球数依存的に泡沫細胞由来のトリチウム標識コレステロールが転送されることが明らかになった．これは，赤血球もアポリポタンパクA-IやHDLだけでなく，コレステロール逆転送系に関与している可能性を示唆している．

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成27年度分の研究予定のコレステロール放出のアクセプターの同定と放出機構の解析は阻害の条件検討に予定より時間を要し，6割程度しか到達していない．しかしながら，その代わりに平成28年度に研究予定であった全研究計画の50%に相当する，”赤血球によるコレステロール逆転送機構への関与”についての研究はおおむね終了している．

Strategy for Future Research Activity

まだ目標に達していないコレステロール放出機構の解析をさらに続けるとともに，平成28年度予定の残りの半分である修飾HDLが赤血球コレステロール放出に与える影響について研究を進めていく．阻害の条件検討に時間を要したが概ね定まっており，今年度は順調に実施できるものと考えている．また，予定している修飾HDLの作製方法はほとんど確立しており，予定通り研究を遂行できるものと考えている．

Research Products

• [Journal Article] Effects of myeloperoxidase-induced oxidation on antiatherogenic functions of high-density lipoprotein. (2015)
  • Author(s): Kameda, T., Ohkawa, R., Yano, K., Usami, Y., Miyazaki, A., Matsuda, K., Kawasaki, K., Sugano, M., Kubota, T., and Tozuka, M.
  • Journal Title: Journal of Lipids Volume: 2015 Pages: -
  • DOI: 10.1155/2015/592594
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Presentation] 血清アミロイドAがHDLの抗酸化能に与える影響． (2016)
  • Author(s): 佐藤 恵美，垂門 碧，大川 龍之介，吉本 明，矢野 康次，三上 周子，生駒 勇人，森田 真麻，賴 劭睿，戸塚 実．
  • Organizer: 第26回生物試料分析科学会年次学術集会
  • Place of Presentation: 沖縄コンベンションセンター，宜野湾市，沖縄県
  • Year and Date: 2016-02-20 – 2016-02-21
• [Presentation] リポタンパクがヒト末梢血単核球（PBMC）のインターロイキン-1β前駆体の発現に与える影響の解析． (2015)
  • Author(s): 亀田 貴寛，伊藤 さやか，宇佐美 陽子，宮崎 あかり，栗原 由利子，大川 龍之介，細萱 茂実，戸塚 実．
  • Organizer: 第62回日本臨床検査医学会学術集会
  • Place of Presentation: 長良川国際会議場，岐阜市，岐阜県
  • Year and Date: 2015-11-19 – 2015-11-22
• [Presentation] Paraoxonase1 participates in antioxidant ability of HDL as a constituent protein but not its enzymatic activity. (2015)
  • Author(s): Yoshimoto A., Sato M., Yano K., Usami Y., Miyazaki A., Sugano M., Ohkawa R., Tozuka M.
  • Organizer: EuroMedLab Paris 2015 the 21st IFCC-EFLM
  • Place of Presentation: Paris, France
  • Year and Date: 2015-06-21 – 2015-06-25
  • Int'l Joint Research