Investigation erythrocyte-associated cholesterol metabolism and its disorder.

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K19174
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 大川 龍之介 東京医科歯科大学, 大学院保健衛生学研究科, 助教 (50420203)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 赤血球 / コレステロール代謝 / 高比重リポタンパク

Outline of Annual Research Achievements

・赤血球のコレステロール放出機構の解析
赤血球から血漿へのコレステロール転送のメカニズムをさらに解明するために，蛍光標識したコレステロール（23-（dipyrrometheneboron difluoride）-24-norcholesterol；BODIPY-Chol）を用いた赤血球膜表面のラベリングを試みた．溶媒の濃度を検討することで，赤血球を溶血させずに，膜表面を蛍光標識することに成功した．次に，この蛍光標識赤血球と血漿を混和，インキュベーションを行い，その後の血漿を解析することで赤血球から放出されたコレステロールの動態を追跡した．結果，血漿中の蛍光強度は赤血球とのインキュベーション時間依存的に増加した．さらに，高速液体クロマトグラフィーで血漿中のそれぞれのリポタンパクの蛍光強度を分析したところ，高比重リポタンパク（HDL）と低比重リポタンパク分画に蛍光コレステロールは転送され超低比重リポタンパク分画にはほとんど転送されないことが明らかになった．
・泡沫細胞から赤血球へのコレステロール輸送経路の同定
赤血球によるコレステロール逆転送機構への関与の解析では，昨年度明らかにした泡沫細胞から赤血球へのコレステロールの転送はアポリポタンパクA-IやHDLを介して行われ，赤血球はコレステロール逆転送のプールとしての役割を担っていることが示唆された．
・修飾HDLの作製（血清アミロイドA（SAA）含有HDL）
赤血球-HDL間のコレステロール代謝の破綻について調べるために，修飾HDLの一つであるSAA含有HDLの作製とその性質を調べた．リコンビナントSAAを用いて，SAA含有HDLを作製することに成功し，さらに通常のHDLより抗酸化能が高いことが明らかになった．今後，上記の赤血球とHDLの作用に関して，作製した修飾HDLを用いてその影響について調べる．

Research Products

• [Int'l Joint Research] Chulalongkorn University(Thailand)
  • Country Name: Thailand
  • Counterpart Institution: Chulalongkorn University
• [Journal Article] High-Density Lipoprotein Binds to Mycobacterium avium and Affects the Infection of THP-1 Macrophages. (2016)
  • Author(s): Naoya Ichimura, Megumi Sato, Akira Yoshimoto, Kouji Yano, Ryunosuke Ohkawa, Takeshi Kasama, Minoru Tozuka
  • Journal Title: J Lipids Volume: 2016 Pages: 4353620
  • DOI: 10.1155/2016/4353620
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Cholesterol Efflux Capacity of Apolipoprotein A-I Varies with the Extent of Differentiation and Foam Cell Formation of THP-1 Cells. (2016)
  • Author(s): Kouji Yano, Ryunosuke Ohkawa, Megumi Sato, Akira Yoshimoto, Naoya Ichimura, Takahiro Kameda, Tetsuo Kubota, Minoru Tozuka
  • Journal Title: J Lipids Volume: 2016 Pages: 9891316
  • DOI: 10.1155/2016/9891316
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Effects of serum amyloid A on the structure and antioxidant ability of high-density lipoprotein. (2016)
  • Author(s): Megumi Sato, Ryunosuke Ohkawa, Akira Yoshimoto, Kouji Yano, Naoya Ichimura, Madoka Nishimori, Shigeo Okubo, Yutaka Yatomi, Minoru Tozuka
  • Journal Title: Biosci. Rep. Volume: 36 Pages: e00369
  • DOI: 10.1042/BSR20160075
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Paraoxonase 1 associated with high-density lipoprotein transfers to oxidized low-density lipoprotein depending on the degree of oxidation. (2016)
  • Author(s): Akira Yoshimoto, Ryunosuke Ohkawa, Kouji Yano, Megumi Sato, Naoya Ichimura, Yoko Usami, Akari Miyazaki, Mitsutoshi Sugano, Takeshi Uehara, Minoru Tozuka
  • Journal Title: Int J Anal Bio-Sci Volume: 4 Pages: 99-109
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 赤血球はアポリポタンパクA-Iによる泡沫細胞からのコレステロール引き抜きに関与している． (2017)
  • Author(s): 賴 劭睿，大川 龍之介，矢野 康次，佐藤 恵美，吉本 明，戸塚 実．
  • Organizer: 第27回生物試料分析科学会年次学術集会．
  • Place of Presentation: 朱鷺メッセ新潟コンベンションセンター（新潟）
  • Year and Date: 2017-02-11 – 2017-02-12
• [Presentation] コレステロール引き抜き能評価は細胞の分化・泡沫化の程度に大きく影響を受ける． (2017)
  • Author(s): 矢野 康次，大川 龍之介，佐藤 恵美，吉本 明，市村 直也，亀田 貴寛，窪田 哲朗，戸塚 実．
  • Organizer: 第27回生物試料分析科学会年次学術集会．
  • Place of Presentation: 朱鷺メッセ新潟コンベンションセンター（新潟）
  • Year and Date: 2017-02-11 – 2017-02-12
• [Presentation] 低比重リポタンパクおよび高比重リポタンパクコレステロール試薬の両方に異常反応を示した一症例． (2016)
  • Author(s): 佐藤 恵美，大川 龍之介，島野 志都子，吉本 明，矢野 康次，泉山 肇，萩原 三千男，東田 修二，戸塚 実．
  • Organizer: 第56回日本臨床化学会年次学術集会．
  • Place of Presentation: くまもと県民交流館パレア（熊本）
  • Year and Date: 2016-12-02 – 2016-12-04
• [Presentation] Impact of Erythrocyte on the cholesterol metabolism. (2016)
  • Author(s): Ohkawa R., Lai SJ., Yoshimoto A., Sato M., Yano K., Tozuka M., Impact of Erythrocyte on the cholesterol metabolism.
  • Organizer: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • Place of Presentation: Taipei (Taiwan)
  • Year and Date: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Erythrocyte is associated with cholesterol efflux from foam cell by apolipoprotein A-I. (2016)
  • Author(s): Lai SJ., Ohkawa R., Yano K., Sato M., Yoshimoto A., Tozuka M.,
  • Organizer: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • Place of Presentation: Taipei (Taiwan)
  • Year and Date: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Oxidized low-density lipoprotein receives antioxidant enzyme paraoxonase 1 from high-density lipoprotein. (2016)
  • Author(s): Yoshimoto A., Ohkawa R., Sato M., Yano K., Tozuka M.
  • Organizer: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • Place of Presentation: Taipei (Taiwan)
  • Year and Date: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Analysis of oxidative susceptibility and fatty acid profile in apolipoprotein E-containing high-density lipoprotein. (2016)
  • Author(s): Ikoma H., Ohkawa R., Yoshimoto A., Yano K., Sato M., Kasama T., Tozuka M.
  • Organizer: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • Place of Presentation: Taipei (Taiwan)
  • Year and Date: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Modification of apolipoprotein A-I in high-density lipoprotein by myeloperoxidase and chymase. (2016)
  • Author(s): Morita M., Ohkawa R., Satou M., Yoshimoto A., Yano K., Kasama T., Tozuka M.
  • Organizer: The 32nd World Congress of Biomedical Laboratory Science.
  • Place of Presentation: Kobe (Japan)
  • Year and Date: 2016-08-31 – 2016-09-04
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Effect of SAA on the antioxidant ability of HDL. (2016)
  • Author(s): Sato M., Ohkawa R., Yoshimoto A., Yano K., Okubo S., Yatomi Y., Tozuka M.
  • Organizer: American Association for Clinical Chemistry (AACC) 2016 Annual Meeting and Clinical Lab Expo.
  • Place of Presentation: Philadelphia (USA)
  • Year and Date: 2016-07-31 – 2016-08-04
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Effect of differentiation and foam cell formation on cholesterol efflux capacity of apolipoprotein A-I. (2016)
  • Author(s): Yano K., Ohkawa R., Sato M., Yoshimoto A., Kubota T., Tozuka M.
  • Organizer: American Association for Clinical Chemistry (AACC) 2016 Annual Meeting and Clinical Lab Expo.
  • Place of Presentation: Philadelphia (USA)
  • Year and Date: 2016-07-31 – 2016-08-04
  • Int'l Joint Research