CRISPRシステムを用いた内視鏡的膵癌治療法開発の基礎検討

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K19356
• Research Institution: Miyagi Prefectural Hospital Organization Miyagi Cancer Center
• Principal Investigator: 虻江 誠 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所), がん幹細胞研究部, 特任研究員 (50599967)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 膵癌 / K-ras / CRISPR / EUS

Outline of Annual Research Achievements

本邦において2003年～2005年に診断された膵癌患者の5年相対生存率は7% と報告されている。この生存率はあらゆる癌種の中で最も低く、20%を下回るのは膵癌のみである。その予後改善には従来にない画期的な治療法が必要である。最近の遺伝子改変マウスを用いた研究により、K-rasの活性化によって発生した膵癌においてK-rasを不活性化すると腫瘍が消褪すること、しかし、そこにわずかに残存する細胞の悪性度が高いことが明らかとなった。また、CRISPRシステムの開発により容易に遺伝子編集が可能となった。申請者らは、CRISPRシステムを用い、膵癌のK-rasを正常化させるとともに残存する腫瘍に特異的に発現する分子を標的とした、同時攻撃による治療法を着想した。このシステムにより、EUSを用いて膵腫瘍に直接ベクターを注入するといった臨床応用が可能である。本研究は、その可能性を、PDX腫瘍と遺伝子改変マウスを用いて基礎的に検証することを目的として研究を開始した。本年度は、Patient-derived xenograft（PDX)の作製とK-ras遺伝子のコドン12を含む領域を標的としたgRNAを作製し、Cas9も発現する同一ベクターの作製を試みた。PDX細胞株は現在までのところ2株作製した。ベクターに関しては現在も作成中である。また、治療効果判定のための遺伝子改変膵癌マウスPdx-1-Cre; LSL-KrasG12D/+を多数作製中である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

PDXの作製に時間を要している。

Strategy for Future Research Activity

PDX株の作製とベクターの作製を行う。K-ras遺伝子不活性化によって残存する膵癌細胞を分離し、その細胞における分子動態を解析する。

Causes of Carryover

PDX株とベクターの作製に遅れが生じているため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

ベクター作成後、PDX株の作製が予定より遅れても遺伝子改変マウスを材料に実験を施行する。