2015 Fiscal Year Research-status Report
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15K19365
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
木村 泰三 筑波大学, 附属病院, 病院講師 (00636508)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | テネイシンC / 心筋梗塞後炎症 / 心室リモデリング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、非感染性炎症の鍵分子であるToll like receptor 4 (TLR4)の新たな内因性リガンドとして注目されている細胞外マトリックス分子、テネイシンC(TNC)に着目し、遺伝子改変マウスを用いて心筋梗塞モデルを作製し、単球・マクロファージを中心とする心筋梗塞後炎症の制御機構におけるTNCの役割を明らかにし、新たな治療ターゲットとしての可能性について検討することを目的とした。
TNCノックアウト(KO)マウスでは野生型マウスと比較して、心筋梗塞４週後の左室収縮が優位に保たれており、左室径も優位に小さいとこから、左室リモデリングが抑制されている事がわかった。また、心筋のFluorescence activated cell sortning (FACS)解析により心筋梗塞後１週間以内の急性期に、浸潤した単球やマクロファージの総数は同等であるが、TNC-KOマウスでは野生型マウスと比較して、優位にF4/80+, CD206+の炎症抑制性M2マクロファージの割合が多く、F4/80+, CD206-の炎症促進生M1マクロファージやCD11b+, Ly6c+の炎症性単球の割合が少なかった。また、急性期にTNC-KOマウスでIL-6, IL-1βなどの炎症性サイトカインの発現が低下していた。さらにマウス骨髄より単離した単球から誘導されたマクロファージに対してTNC刺激は M1マーカー発現を増加させ、IL4刺激で誘導されたM2マクロファージに対しては、M2マーカーの発現を抑制した。以上より、TN-Cはマクロファージのサブセット制御を介して心筋梗塞後の炎症を持続させ、心室リモデリングを悪化させていると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
予定していたin vivoとin vitroの研究から、テネイシンCは心筋梗塞後急性期の炎症と慢性期左室リモデリングを増強することが確認できた。そのメカニズムとしてテネイシンCによる心筋梗塞後浸潤マクロファージのサブセット制御が示唆された。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、テネイシンCによるマクロファージサブセット制御に関与している受容体を確認する。TLR４を想定している。またマクロファージにおける、テネイシンCにより誘導される下流の細胞内シグナル分子を突き止める予定である。さらに、トランスジェニックマウスを用いて心筋梗塞モデルを作製し、ノックアウトと同様に評価していく予定である。
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| Causes of Carryover |
初年度にトランスジェニックマウスを使用した研究をしなかったため、マウス飼育費や生化学消耗品費用が残った。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
マウス骨髄由来マクロファージにおけるテネイシンCの受容体およびその下流の細胞内シグナルを同定するための培養実験、生化学実験をおこなう。また、テネイシンCトランスジェニックマウスを使った心筋梗塞実験を行う。
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