Analysis of the effect of cinacalcet hydrochloride for regression of hyperplasia of parathyroid

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K19469
• Research Institution: Tokai University
• Principal Investigator: 巽 亮子 東海大学, 医学部, 助教 (60631819)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 内分泌学 / 副甲状腺機能亢進症

Outline of Annual Research Achievements

（１）シナカルセト処方副甲状腺における細胞周期と細胞死の関連の調査
シナカルセト処方／非処方患者の副甲状腺組織切片に対し、細胞周期及び細胞死に関連する因子の免疫染色を行い、腺退縮の機序を調査した。シナカルセト処方腺全域においてp27Kip1発現の減少とリン酸化Rbの発現が観察されたことから、全ての細胞がG0期から脱する可能性を持つが、c-myc発現細胞は散在して観察されることから、実際にG1期へ移行できる細胞の数は限定されていることが示された。カスパーゼは細胞周期にある細胞に発現しており、細胞死経路は細胞周期から分岐すると推測された。
（２）網羅的遺伝子発現調査による比較検討
シナカルセト処方／非処方患者での遺伝子発現の差異を網羅的に捉えるため、マイクロアレイあるいは次世代RNAシークエンスを行う予定であったが、過形成副甲状腺においては副甲状腺ホルモンが過剰に発現されているため、細胞周期や細胞死に重要な調整因子の検出が困難になると予測されたので、遺伝子発現調節に重要な役割を果たすことが知られているmicro-RNAシークエンス（miRNA-Seq）による網羅的な塩基配列検索を行った。シナカルセト処方／非処方患者の副甲状腺から抽出したmiRNAについて、それぞれ100万本以上のリード数で解析を行ったところ、約１／４が既知のmiRNAに相当し、その数は約２６００種類であった。いずれかの腺で１万リード以上検出されたものは７２種類、１万以下１千リード以上のものは１０３種類あった。そのうち、シナカルセト処方腺で非処方腺の２倍以上発現しているものが約４０種類（最大４０００倍）、非処方腺で処方腺の２倍以上発現しているものが約１２０種類（最大２５倍）見つかった。これらの内にシナカルセト処方により発現が調節されるものがあると思われるので、現在、解析をさらに進め、標的遺伝子の予測と検出を行っている。