2016 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of a mechanism of ALS system selectivity focusing on TDP-43 function in interneurons.
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15K19479
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
石原 智彦 新潟大学, 脳研究所, 助教 (70612232)
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2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ALS / 介在ニューロン / スプライシング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は筋萎縮性側索硬化症の病態機序解明を目的とする．我々はALSのkey molecule である TDP-43の機能から，ALS罹患組織におけるRNA代謝の異常に焦点をあて研究を進めている．既にALS罹患組織における，複数のmRNAのスプライシング異常およびスプライシング異常の原因となる U snRNAs およびGEM小体の減少を見出し，学術誌に報告を行っている．
本研究では介在ニューロンの機能異常に注目し，そのRNA代謝の検討を目的とした．それに先駆けて，iPS細胞技術を用いて，同細胞由来の運動神経細胞を作成し，運動神経マーカーの発現を確認した．また脊髄でのホルマリン固定パラフィン包埋組織（FFPE）からのmRNAの回収，およびその定量についての検討を行った．同検体ではmRNAの断片化が生じており，定量に際し増幅産物サイズに留意する必要がある事を見出した．
さらに運動神経変性に関連しうるスプライシング変化として，stasimon mRNA に注目し解析を行った．これはALSと同様の運動ニューロン疾患である，脊髄性筋萎縮症モデル動物において，介在ニューロンを介した下位運動ニューロン変性の原因として報告されている．われわれの検討では，同スプライシング変異は，TDP-43発現抑制ヒト培養細胞において確認されたが，ALS脊髄由来mRNAでは変化は確認されなかった．
今後の課題としては，介在ニューロンの障害がALS病態に与える影響をより直接的に証明する必要がある．動物モデルなどを用いた解析や，介在ニューロンの障害を起こす遺伝子の絞り込みなどが必要となる．
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