細胞内シグナル伝達分子JAK2の変異特異的に活性化される転写因子の機能解析

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K19559
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 枝廣 陽子 順天堂大学, 医学部, 助教 (40732863)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: JAK2V617F / 骨髄増殖性腫瘍

Outline of Annual Research Achievements

骨髄増殖性腫瘍は、造血幹細胞の異常によって、骨髄系細胞のクローナルな増殖をおこす疾患であり、代表的な3疾患である真性赤血球増加症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症の患者の多くが、JAK2V617F変異を有することが分かっている。これまでにJAK2阻害薬の臨床応用が行われているが、野生型のJAK2も阻害するため副作用が多く、新たな治療戦略が求められている。これまでに、申請者はJAK2V617F特異的に活性化される転写因子の存在を明らかにしており、本研究ではJAK2V617F変異特異的な新規治療薬の開発を目的とした。
平成27年度は、順天堂医院血液内科に通院中の患者の瀉血検体からJAK2V617F変異の定量を行なうとともに、CD34陽性細胞を抽出し収集し、in vitroでこの転写因子の役割の解析を行なった。得られた患者検体からRNAを抽出し、この転写因子の定量化の条件検討を行うとともに、コントロール検体の検討を行った。
また、この転写因子を用いたレポーターアッセイ系を構築し、JAK2阻害薬を用いてその高い感受性を確認した。
さらに、この転写因子の標的遺伝子を明らかにするために、JAK2V617Fを誘導する細胞株を新たにつくり、マイクロアレイ法によりAIM2、IL1B、CASP1などの遺伝子がJAK2V617Fにより誘導されることを示し、Experimental Hematology and Oncologyに報告した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成27年度の目標は、JAK2V617F特異的な転写因子のin vivoおよびin vitroでの役割の解明であった。in vitroでの解析は現在も進行中であるが、平成28年度の目標であった分解阻害のメカニズムの解明を今年度行なうことができ、また新たにレポーターアッセイによる薬剤スクリーニングシステムの構築も行なうことができたため、おおむね順調に進展していると考える。

Strategy for Future Research Activity

JAK2V617F特異的な転写因子の標的遺伝子を明らかにし、細胞の腫瘍化のメカニズムを明らかにしていく。

Research Products

• [Journal Article] Activation of the thrombopoietin receptor by mutant calreticulin in CALR-mutant myeloproliferative neoplasms. (2016)
  • Author(s): Araki M, Yang Y, Masubuchi N, Hironaka Y, Takei H, Morishita S, Mizukami Y, Kan S, Shirane S, Edahiro Y, Sunami Y, Ohsaka A, Komatsu N
  • Journal Title: Blood Volume: 127 Pages: 1307-1316
  • DOI: 10.1182/blood-2015-09-671172
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of AIM2 as a downstream target of JAK2V617F. (2016)
  • Author(s): Liew EL, Araki M, Hironaka Y, Mori S, Tan TZ, Morishita S, Edahiro Y, Ohsaka A, Komatsu N
  • Journal Title: Experimental Hematology & Oncology Volume: 5 Pages: 2
  • DOI: 10.1186/s40164-016-0032-7
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Application of genetic data to clinical practice of MPN. (2015)
  • Author(s): Edahiro Y
  • Journal Title: Rinsho Ketsueki Volume: 56 Pages: 949-955
  • DOI: 10.11406/rinketsu.56.949
• [Journal Article] Current problems in the diagnosis of Philadelphia-negative myeloproliferative neoplasms in Japan. (2015)
  • Author(s): Shirane S, Araki M, Morishita S, Edahiro Y, Ohsaka A, Komatsu N.
  • Journal Title: Rinsho Ketsueki Volume: 56 Pages: 877-882
  • DOI: 10.11406/rinketsu.56.877
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Activation of AP-1 by JAK2V617F through induction and stabilization of c-Fos (2015)
  • Author(s): Edahiro Y, Araki M, Hironaka Y, Yang Y, Morishita Y, Sunami Y, Ohsaka A, Komatsu N
  • Organizer: 57th Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • Place of Presentation: Orlando FL, USA
  • Year and Date: 2015-12-05 – 2015-12-08
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] A highly specific method for detecting a single copy JAK2V617F mutation (2015)
  • Author(s): Morishita S, Araki M, Hironaka Y, Sunami Y, Edahiro Y, Tsutsui M, Ohsaka A, Komatsu N
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢、石川県、日本
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [Presentation] Early disease onset of patients with triple-negative myeloproliferative neoplasms (2015)
  • Author(s): Shirane S, Araki M, Morishita S, Edahiro Y, Takei H, Tsumura M, Hironaka Y, Ochiai T, Misawa K, Ohsaka A, Komatsu N
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢、石川県、日本
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [Presentation] Establishment of iPS cells from myeloproliferative neoplasms patients with CALR mutation. (2015)
  • Author(s): Takei H, Morishita S, Araki M, Mizukami Y, Edahiro Y, Sunami Y, Hironaka Y, Tsumura M, Tsuneda S, Endo H, Nakamura S, Eto K, Ohsaka A, Komatsu N.
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢、石川県、日本
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18