Identification of a new transcriptional cascade activated by oncogenic JAK2 tyrosine kinase mutant

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K19559
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 枝廣 陽子 順天堂大学, 医学部, 助教 (40732863)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 骨髄増殖性腫瘍 / JAK2V617F変異

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、これまでに申請者が同定しているJAK2V617F特異的に活性化される転写因子による骨髄増殖性腫瘍の発症メカニズムを明らかにすることで、JAK2V617Fを特異的に阻害する骨髄増殖性腫瘍の新たな治療戦略を開発することを目的とした。
平成29年度は、前年度に引き続き、患者瀉血検体からCD34陽性細胞を抽出し、JAK2V617F変異の同定を行ない、またこれらの細胞を保存して、実験に用いた。
また、JVRBP1を特異的に阻害する阻害薬を入手し、この阻害薬のin vitroでの効果の解析を行った。具体的には、JAK2V617F陽性の細胞株および、患者検体から抽出した細胞に、この阻害薬を投与し、まずは細胞増殖を評価するために、サイトカイン非依存性の赤芽球コロニーの形成の有無を観察した。さらに、JAK2V617Fの下流のシグナル伝達系の解析を行なうために、阻害薬パネルを用いて、それぞれのシグナルの解析を行うとともに、プロモーター解析を行った。
本研究ではJVRBP1がJAK2V617F特異的に活性化されることは明らかになったものの、阻害薬のin vitro、in vivoでの効果の検討には、さらなる研究が必要と考えた。
また、近年JAK2V617F変異を有さない骨髄増殖性腫瘍の患者の多くが、Calreticulin(CALR)変異を有することが明らかになった。CALR変異においても、JAK2V617F変異と同様にJAK-STAT経路を活性化することが明らかになっていることから、前年度からこのCALR変異の有無についても評価を行っており、JVRB1がCALR変異陽性の細胞で活性化されるかについても検討を行った。

Research Products

• [Journal Article] utational subtypes of JAK2 and CALR correlate with different clinical features in Japanese patients with myeloproliferative neoplasms. (2018)
  • Author(s): 3.Misawa K, Yasuda H, Araki M, Ochiai T, Morishita S, Shirane S, Edahiro Y, Gotoh A, Ohsaka A, Komatsu N.
  • Journal Title: International journal of hematology Volume: - Pages: -
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The 2014 BCSH criteria and the 2016 WHO criteria for essential thrombocythemia: a comparison in a large-scale cohort (2018)
  • Author(s): Ochiai T, Yasuda H, Araki M, Misawa K, Morishita S, Nudejima M, Hironaka Y, Shirane S, Edahiro Y, Gotoh A, Ohsaka A, Komatsu N.
  • Journal Title: European journal of haematology Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1111/ejh.13041
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The 2016 WHO diagnostic criteria for polycythemia vera renders an accurate diagnosis to a broader range of patients including masked polycythemia vera: comparison with the 2008 WHO diagnostic criteria. (2017)
  • Author(s): Misawa K, Yasuda H, Araki M, Ochiai T, Morishita S, Nudejima M, Hironaka Y, Shirane S, Edahiro Y, Gotoh A, Ohsaka A, Komatsu N.
  • Journal Title: American journal of hematology Volume: 92 Pages: E128-E130
  • DOI: 10.1002/ajh.24752
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Localization of Mutant Calreticulin in the Golgi Apparatus Is Required for Its Oncogenic Capacity. 59th Annual Meeting of the American Society of Hematology. (2017)
  • Author(s): Nami Masubuchi, Marito Araki, Erina Hayashi, Yinjie Yang, Misa Imai, Yoshihiko Kihara, Yoshihisa Mizukami, Yumi Hironaka, Hiraku Takei, Yoko Edahiro, Akimichi Ohsaka, Norio Komatsu.
  • Organizer: 59th Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] ESTABLISHMENT OF AN IN VITRO MODEL FOR THE SKEWED MEGAKARYOPOIESIS BY CALRETICULIN MUTATION IN HUMAN CELLS (2017)
  • Author(s): Hiraku Takei, Shuichi Mano, Nami Masubuchi, Yoshihisa Mizukami, Soji Morishita, Misa Imai, Yoko Edahiro, Yumi Hironaka, Mai Nudejima, Satoshi Tsuneda, Hiroshi Endo, Sou Nakamura, Koji Eto, Akimichi Ohsaka, Marito Araki, Norio Komatsu.
  • Organizer: 22nd Congress of EHA
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 骨髄増殖性腫瘍に見出される変異型CALR 蛋白質の細胞内局在. (2017)
  • Author(s): 林英里奈、荒木真理人、増渕菜弥、水上喜久、楊印杰、今井美沙、弘中由美、竹井拓、木原慶彦枝廣陽子大坂顯通、小松則夫
  • Organizer: 第79回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 変異型CALR タンパク質の発現を制御するメカニズム. (2017)
  • Author(s): 木原慶彦、荒木真理人、楊印杰、今井美沙、増渕菜弥、水上喜久、弘中由美、竹井拓、枝廣陽子、大坂顯通、小松則夫
  • Organizer: 第79回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 変異型CALR による巨核球分化偏向性はGATA2の発現亢進と相関している. (2017)
  • Author(s): 竹井拓、眞野修一、増渕菜弥、水上喜久、今井美沙、森下総司、枝廣陽子、弘中由美、橳島麻衣、遠藤大、中村壮、江藤浩之、大坂顯通、荒木真理人、小松則夫
  • Organizer: 第79回日本血液学会学術集会
• [Presentation] Engagement of mutant calreticulin and MPL in acellular compartment is required for MPL activation. (2017)
  • Author(s): 増渕菜弥、荒木真理人、林英里奈、楊印杰、今井美沙、水上喜久、弘中由美、竹井拓、森下総司、木原慶彦、枝廣陽子、大坂顯通、小松則夫
  • Organizer: 第79回日本血液学会学術集会