2016 Fiscal Year Research-status Report
膠原病様モデルマウスを用いたT細胞活性化をもたらす新規脂質メディエータの同定
| Project/Area Number |
15K19577
|
|---|
| Research Institution | Oita University |
|---|
Principal Investigator |
尾崎 貴士 大分大学, 医学部, 医員 (70749374)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | 脂質メディエーター / LC-MS / 膠原病 / 炎症 / 樹状細胞 / Toll様受容体 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
計158種類の脂質メディエーター関連物質を一斉解析することが可能となる液体クロマトグラフ・質量分析計(LC-MS)を用いた解析方法を前年度に立ち上げた。この手法を用いて、全身性エリテマトーデス（SLE）のモデルマウスであるMRL/lprマウスの各臓器や血液中の脂質メディエーター関連物質を測定し、野生型マウスと比較した。その結果、リンパ節や脾臓、血中において、脂質代謝産物である物質Aの濃度が低下していることが判明した。
この脂質代謝産物AがSLEの発症機序と関連しているかどうかを調べるため、マウス骨髄細胞由来の樹状細胞を用いた実験を行った。マウス骨髄細胞由来の樹状細胞に対して、Toll様受容体9(TLR9)刺激を加えることによって産生されるIL-6, IL-12, TNF-αといった炎症性サイトカインの分泌が、脂質代謝産物Aを加えることにより抑制されることを見出した。また、マウス由来のマクロファージ細胞株であるRaw 264.7細胞においても、TLR9刺激を加えた際の炎症性サイトカイン分泌を脂質代謝産物Aは有意に抑制した。
また、Raw 264.7細胞にTLR7刺激を加えた際の補助刺激シグナル分子CD86の発現レベルをFACSにて解析した結果、脂質代謝産物Aを投与することによりCD86の発現が低下することが判明した。
以上より、MRL/lprマウスの二次リンパ組織や血中において減少していた脂質代謝産物Aは、マウス樹状細胞やマクロファージなどの抗原提示細胞におけるTLR9刺激による炎症性サイトカイン産生を抑制する抗炎症性の脂質メディエーターである可能性が示唆された。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は、膠原病モデルマウスを用いたLC-MS解析により、二次リンパ組織中において脂質代謝産物Aの濃度が低下していることを見出した。また、樹状細胞のToll様受容体刺激に対して脂質代謝産物Aは抑制性の作用を有する可能性が示唆された。脂質代謝産物Aの抑制性作用について、詳細な分子メカニズムの解明は今後の課題である。
|
| Strategy for Future Research Activity |
全身性エリテマトーデスモデルマウスの二次リンパ組織中に含まれる濃度が低下していた脂質代謝産物Aが抗原提示細胞のTLR7やTLR9刺激による炎症性サイトカイン分泌を抑制する分子機構の解明を目標とする。具体的には、細胞内シグナル伝達への影響や作用する受容体の特定を目指す。また、脂質代謝産物Aがマウス生体内において抗炎症作用を有するかどうかについて、炎症病態モデルマウスを用いたin vivoの実験も行う予定である。
|
| Causes of Carryover |
動物の繁殖状況や実験結果に基づき、適宜実験計画の修正を行ったため
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度に主に消耗品の費用として使用する予定
|
