Examination of treatment strategy for intractable C. difficile infection using the mouse C. difficile infection microbiota model

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K19593
• Research Institution: Toho University
• Principal Investigator: 山口 哲央 東邦大学, 医学部, 助教 (10408239)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: CDI / プロバイオティクス / 腸内細菌叢 / 次世代シーケンサー

Outline of Annual Research Achievements

抗菌薬関連腸炎の中でもClostridium difficile腸炎(CDI)は代表的な疾患であるが、近年、強毒型C. difficileが欧米を中心に問題となっており、その病態解析と適切な治療指針が求められている。今回我々は、臨床病態に近いCDIマウスモデルを確立し、その解析を行うことでCDIの「発症機序の解明」および「最も適 切な治療方針の検討」を行う。さらに臨床上問題となっている、難治性CDIや再発性CDIをマウスモデルで再現し、プロバイオティクスによる発症予防効果やCDI 治療薬による再発予防効果を検討することで「CDIの新たな治療戦略の方向性」を提案することが目的である。まず、CDIマウスモデルにおいて除菌抗菌薬の検討を行った。効率よくCDIを発症させる除菌抗菌薬の種類と組み合わせを明らかにし、次にCD投与前後に除菌抗 菌薬を投与することでCDI発症の程度に差があるかを評価することが目的であったが、再発モデルの作成は困難であった。そこで、腸内細菌叢の撹乱が少ない C57BL/6マウスモデルを用いて、次世代シーケンサーを用いた16S rRNA遺伝子解析により、除菌抗菌薬投与前後、CDI発症前後、抗CD薬投与前後の腸内細菌叢の変化を確認した。抗菌薬投与により腸内細菌叢は大きく変化し、CDI発症時、バンコマイシン治療時、フィダキソマイシン治療時、プロバイオティクス治療時の腸内細菌叢もそれぞれ異なることが明らかになっている。腸内細菌叢の撹乱がCDI再発のリスクになるため、CDI発症時および抗CD薬投与時の腸内細菌叢の変化を明らかにすることは重要である。腸内細菌叢の撹乱を最小限に抑え、再発を予防する治療法について検討し、現在論文投稿準備中である。