2016 Fiscal Year Research-status Report
胃癌微小環境における脂肪由来幹細胞の機能解析と間質線維化制御への応用
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15K19876
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
木下 淳 金沢大学, 医学系, 協力研究員 (90584855)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 胃癌 / 脂肪由来幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脂肪由来幹細胞(ADSC)はこれまでにいくつかの固形腫瘍において、腫瘍関連線維芽細胞(Cancer Associated Fibroblastoma: CAF)として機能し、癌間質の線維化を誘導する事が報告されている。胃癌においても、腹膜播種のomental cake に代表されるように脂肪組織の線維化が顕著であるが、胃癌細胞とADSCとの細胞間相互作用に関しては十分に検討されていない事から本研究を立案した。
まず、同意を所得したヒト大網の脂肪組織よりADSCを分離培養し、細胞表面マーカー(CD22,44,90,105+/14,31,34,45-)をFACSにて解析しpurityを確認した。
ヌードマウス皮下に胃癌細胞とADSCを5×106個共投与し、胃癌細胞単独投与群と比較した結果、ADSCとの共投与により有意な造腫瘍能の亢進を認め、腫瘍内の線維化の増生と共にE-cadherinの減弱、αSMAの発現が亢進していた事から、ADSCが胃癌組織においてもCAFとして機能し、癌細胞のEMTを誘導している事が示された。
さらにCAFのマーカーであるαSMA, FAP蛋白が共にADSCに発現する事を蛍光免疫染色で確認した。また、Spheroid formation assayにおいて胃癌細胞株単独に比較し、ADSC共培養においてsphere形成能が亢進し、SOX2,Nanog等のstemness関連蛋白の発現が亢進する事が確認された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度の検討内容は概ね順調に実施している。
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| Strategy for Future Research Activity |
ADSCが化学療法耐性に与える影響をマウス皮下腫瘍線維化モデルを用いて検討する。腫瘍サイズの評価、癌幹細胞関連蛋白の発現を免疫組織学的に評価する。
また、ADSCによる癌細胞の幹細胞化に関与するターゲット分子、蛋白をchemokine array等で解析し、標的治療への応用の可能性を検証する。
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| Causes of Carryover |
今年度開始を予定していたヌードマウスを使用した検討を行わなかったため
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度に今年度予定していたヌードマウスを購入し、皮下腫瘍モデルを使用した検討を実施予定である
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Research Products
(2 results)
