2018 Fiscal Year Annual Research Report
MiR-141-3p is upregulated in esophageal squamous cell carcinoma and targets pleckstrin homology domain leucine-rich repeat protein phosphatase-2, a negative regulator of the PI3K/AKT pathway
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15K19912
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| Research Institution | Nippon Medical School |
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Principal Investigator |
赤城 一郎 日本医科大学, 大学院医学研究科, 研究生 (90552662)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | miR-141 / PI3K / AKT |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はこれまでの研究においてmiR-141、miR-200b、miR-200c、miR-205の発現が食道扁平上皮癌細胞株において有意に高値であることを明らかにした。さらにPI3K-Akt-mTOR経路を阻害し、かつTargetScanデータベースにおいて前述のmiRNAの標的となる可能性を持つものを選抜した結果、miR-200bおよびmiR-200cの標的候補としてDNA damage-inducible transcript 4 protein（DDIT4）を、miR-141の標的候補としてPH Domain Leucine-Rich Repeat-Containing Protein Phosphatase 2（PHLPP2）を見出した。またDDIT4、PHLPP2の発現が食道扁平上皮癌細胞株上で有意に低下していることも明らかにした。
miRNA強制発現によるDDIT4およびPHLPP2発現への影響を評価するため、正常食道扁平上皮株（Het-1a）にmiRNAを強制発現させ標的候補遺伝子の発現量をRT-PCRにより定量した。Het-1aに対するmiR-141の強制発現によりPHLPP2の発現がmRNA、タンパク質レベルで低下した。この結果がmiR-200bおよびmiR-200cの強制発現によるDDIT4の発現抑制と比べて大きいことから、PHLPP2発現とmiR-141発現との関係に研究対象を絞って詳細に調査することにした。
ルシフェラーゼアッセイにてmiR-141-3pは、negative controlに比較してactivityが低いことが示された。以上より、miR-143-3pはPHLPP2を介して癌の進展を促すPI3K/AKT pathwayを抑制することが示され今後の分子標的薬の標的になる可能性が示唆された。
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