2015 Fiscal Year Research-status Report
関節リウマチ病態にかかわる滑膜マクロファージにおけるC型レクチンの検討
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15K20006
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
小山田 亜希子 (堀亜希子) 九州大学, 大学病院, 研究員 (30589461)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | C型レクチン / 関節リウマチ / Mincle / MCL |
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| Outline of Annual Research Achievements |
関節リウマチ(rheumatoid arthritis; RA)は慢性持続性の滑膜関節炎を呈する疾患であり、これまでその病因については解明されていない。本研究では滑膜に存在する自然免疫細胞の一つであるマクロファージにおけるmacrophage inducible C-type lectin(Mincle)やmacrophage C-type lectin(MCL)などのC型レクチンに着目した。これらの役割を解析するため、まず、マウスのコラーゲン誘導性関節炎(Collagen-induced arthritis; CIA)モデルを用いた。CIAの誘導は、トリII型コラーゲンと結核死菌を含む完全フロイントアジュバントのemulsionを0日と21日の2回、皮内注射を行うことで行った。C57BL/6背景の野生型(WT)マウスではほぼ毎回80％以上の発症率を確認した。次にMincle遺伝子欠損(Mincle KO)マウスを用いてCIA誘導を行ったところ、Mincle KOマウスではWTマウスと比較して発症率と関節炎症スコアの減弱がみられた。同様にMCL遺伝子欠損(MCL KO)マウスを用いてCIAを誘導したところMincle KOマウスと同じようにWTと比して発症率や関節炎症スコアは減弱していた。いずれのマウスにおいてもCIAの発症は完全には抑制されていなかった。このことからマウスCIAモデルにおいてはC型レクチンは関節炎病態形成に関わっていることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Mincle KOマウスやMCL KOマウスの個体数の確保が十分でない。またMCL KOマウスに関してはバッククロスも十分とはいえない。これらを解決してCIA誘導実験を今後繰り返して行い、これらの分子のCIAモデルでの重要性を確認する必要がある。また、リンパ球やサイトカインの関連につてもまだ確認ができていない。
ヒトの検体を用いた研究についてもまだ十分になされていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
Mincle KOマウス、およびMCL KOマウスの個体数を確保し、MCL KOマウスについてはバッククロスも十分に行い、CIAにおけるこれらの分子の重要性の再現性を確認する。CIAモデルにおける抗CII抗体価やリンパ球におけるサイトカイン産生の変化などを調べ、WTマウスとKOマウス間での比較を行う。
健常人、RA患者の検体を用いた解析も進めていく。
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| Causes of Carryover |
Mincl KOマウスとMCL KOマウスの個体数の確保が難しく、CIA関節炎誘導が十分におこなうことができず、この実験に使用するコラーゲン、完全フロイントアジュバント、結核死菌、フローサイトメトリー解析や抗体価を測定するための抗体(複数)などの試薬の購入を行わなかったためである。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
トリII型コラーゲン(CII)、完全フロイントアジュバント(CFA)、結核死菌を購入し、CIA誘導実験を繰り返し行う。また必要な抗体を購入して、CIA誘導後の血中抗CII抗体価をELISAで測定し、所属リンパ節における細胞について、表面抗原の発現やサイトカイン産生を抗体で染色しフローサイトメトリーによる解析を行っていく予定である。
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[Journal Article] Brief report: successful in vitro culture of rheumatoid arthritis synovial tissue explants at the air-liquid interface.2015
Author(s)
Sakuraba K, Fujimura K, Nakashima Y, Okazaki K, Fukushi J, Ohishi M, Oyamada A, Esaki Y, Miyahara H, Iwamoto Y, Yoshikai Y, Yamada H
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Journal Title
Arthritis Rheumatol.
Volume: 67
Pages: 887-92
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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