腫瘍融解性Ad-REICを用いた新規癌ワクチン療法の開発

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K20093
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 黄 鵬 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (00610841)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: REIC/DKK-3 / 制限増殖型アデノウイルスベクター / 免疫活性

Outline of Annual Research Achievements

平成27年度は、REIC遺伝子発現制限増殖型アデノウイルスベクターのin vitroおよびin vivoでの細胞・腫瘍増殖抑制効果の解析（第一世代Ad-REIC製剤（非増殖型）と比較）を行いました。具体的には：a)　正常細胞や様々な癌由来の細胞株の細胞増殖抑制効果をMTS法を用いて解析した。b)　REIC遺伝子発現制限増殖型アデノウイルスベクターの導入効率を種々の細胞株を用いて解析する。またアポトーシス誘導能についてはTunnel法、ELISAを用いた解析を行った。c) 癌の全身転移マウスモデルでの抗腫瘍効果につき、ルシフェラーゼを恒常発現する胚細胞癌細胞株（RENCA-Luc）を用いて同所移植モデル、肺転移モデル等を作製し、REIC遺伝子発現制限増殖型アデノウイルスベクターを投与した場合の全身の転移に対する治療効果を解析した。
d)　抗癌免疫の活性化の解析につき、REIC遺伝子発現制限増殖型アデノウイルスベクターを用いて治療を行った腫瘍内における抗癌免疫担当細胞の出現動態、特に抗癌免疫に強く関わるとされる、MDSC、樹状細胞、細胞傷害性Tリンパ球（CTL）、制御性Tリンパ球、ヘルパーTリンパ球、ナチュラルキラー（NK）細胞等の細胞について、それぞれの細胞表面マーカーに基づき免疫組織学的に解析した。同時に、局所投与に基づく治療効果を検証し、全身的な抗癌免疫活性の指標とする為、CTL　assay、NK assay等を実施した。特に当該治療効果については、腎癌に対する分子標的治療薬として臨床の場で使用されているソラフェニブとの間で比較・検証を行った。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

今年度は、REIC遺伝子発現制限増殖型アデノウイルスベクターのin vitroおよびin vivoでの細胞・腫瘍増殖抑制効果の解析（第一世代Ad-REIC製剤（非増殖型）と比較）し、広範な抗癌免疫担当細胞の抑制作用を示すMDSCの分化をREIC/Dkk-3タンパク質が阻害するメカニズムの解析し、各種の知見を得た。

Strategy for Future Research Activity

平成27年に引き続き、広範な抗癌免疫担当細胞の抑制作用を示すMDSCの分化をREIC/Dkk-3タンパク質が阻害するメカニズムの詳細を解明し、癌免疫逃避の抑制および癌ワクチン化の観点から、次世代REIC遺伝子発現制限増殖型アデノウイルスベクターの有用性を検証する。

Causes of Carryover

当初の予定より物品を安く購入できたため、未使用額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

平成28年度は、平成28年度支払い請求分に本年度未使用分を宛がい、引き続き研究計画に基づき有効に適正に使用する。

Research Products

• [Journal Article] A combination of YM-155, a small molecule survivin inhibitor, and IL-2 potently suppresses renal cell carcinoma in murine model (2015)
  • Author(s): Guo K, Huang P, Xu N, Xu P, Kaku H, Zheng S, Xu A, Matsuura E, Liu C, Kumon H
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 6 Pages: 21137-21147
  • DOI: 10.18632/oncotarget.4121
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] The proof of concept of REIC/Dkk-3 gene therapy for thoracic malignancies (2016)
  • Author(s): Shinichi Toyooka, Ken Suzawa, Kazuhiko Shien, Masakiyo Sakaguchi, Masami Watanabe, Peng Huang, Kei Namba, Hidejiro Torigoe, Hiroki Sato, Junichi Soh, Hiromasa Yamamoto, Yuho Maki, Kazunori Tsukuda, Shuta Tomida, Yasutomo Nasu, Hiromi Kumon, Shinichiro Miyoshi.
  • Organizer: Tenth AACR-JCA Joint Conference
  • Place of Presentation: Maui USA
  • Year and Date: 2016-02-16 – 2016-02-20
  • Int'l Joint Research