子宮内膜症におけるケモカインシステムの分子病理学的研究

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K20155
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 溝口 美佳 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (80647561)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 子宮内膜症 / ケモカイン / サイトカイン

Outline of Annual Research Achievements

本研究では，ケモカインシステムに着目し，子宮内膜症におけるケモカインの分子病態生理学的役割を解明している．
まず最初にマウス子宮内膜症モデルを確立した．モデル作成方法は以下の通りである．ホルモン動態の差を無くすために卵巣摘出術をレシピエントとドナーマウスともに行った．エストロゲンを毎週投与し，ホルモン動態を同調させ，子宮内膜の肥厚を図った．卵巣摘出術の２週間後にドナーマウスから子宮を摘出し，ないまくのみを剥離し，ドナーマウスの腹腔内に移植した．移植後も毎週エストロゲン投与を行い，４週間後に開腹し内膜症様病変と思われる嚢胞性病変が形成されていることを確認した．
ヒト子宮内膜症で診断目的に行われるエストロゲン受容体(ER)，プロゲステロン受容体(PR)，CD10の免疫組織化学染色を行い陽性であったため，マウスモデルの病変は内膜症病変であると確認できた．
宿主におけるケモカインシステムの機能解析のため，遺伝子改変マウス(Ccl3-/-, Ccr1-/-, Ccr2-/-, Ccr5-/-, Cx3cr1-/-)と野生型(WT)マウスで子宮内膜症モデルを作成し，病変形成に差があるのか，腹水や病変をサンプリングし，Real time(RT)-PCR法，免疫組織学染色，ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)法及びフローサイトメトリー法にて解析する．これらの検討により，候補分子を特定し，阻害剤や中和抗体による治療効果も検討する．

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

マウス子宮内膜症モデルの作成方法は確立したものの，安定したマウスモデルを供給できず、実験計画はやや遅れている．

Strategy for Future Research Activity

平成２８年の研究を鋭意継続しながら，マウスモデルを安定させ，サンプル解析をさらに進め，中和抗体，阻害剤による治療効果の検討を継続する．またすでに本学倫理委員会の承認を得ている当該医療機関において実施された手術により得られる臨床検体を用いて，子宮内膜症嚢胞（チョコレート嚢胞）における当該ケモカイン及びケモカイン受容体の発現と臨床的特徴と分子病理学的検討を行う予定である．

Causes of Carryover

今年度はマウスモデルが安定せず，ヒトサンプルの解析に専念していた
学会発表を行わなかった

Expenditure Plan for Carryover Budget

来年度は阻害剤や中和抗体での治療効果判定の実験を計画しており，マウスや中和抗体の購入に充当する．
またデータも蓄積してきているため，海外学会での発表も検討しており，学会参加の旅費にも充当する．