2017 Fiscal Year Research-status Report
上皮性卵巣癌におけるARID1Aの細胞競合現象を介したがん抑制メカニズムの解明
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15K20166
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| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
上川 篤志 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 研究技術員 (60534253)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ARID1A / 癌抑制遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ARID1Aの機能喪失は多くのがんで頻繁に見られる現象であり、ARID1Aは真のがん抑制遺伝子であることがわかってきた。本研究はARID1Aのがん抑制機能の中でも細胞増殖制御と細胞競合という新たな概念に焦点を当てながら、ARID1Aの発現が消失した変異細胞がどのように周囲の正常細胞と相互作用しながら腫瘍かしていくのかを解明することを目的としている。これまでに、ARID1Aが発現する、あるいはARID1Aをノックアウトし且つ蛍光タンパク質で標識された細胞株を20種類作製した。まずはそれぞれ単独で培養したときの増殖曲線を確認したところ、ARID1Aを欠損させた細胞は細胞増殖が亢進し、反対にARID1Aを発現している細胞では細胞増殖が抑制されていた。この結果は他の報告とも一致し、ARID1Aは細胞増殖を抑制する機能を持つことが伺える。次に、これらの細胞株を共培養したときの細胞増殖過程をタイムラプス顕微鏡にて観察した結果、いくつかの細胞同士の組み合わせにおいてARID1Aを欠いた細胞がARID1A発現細胞よりも優位に増殖する様子が観察できた。次に、マウス初代培養系でも確認するために、卵巣名細胞癌の発生母地であると考えられている卵巣表層上皮細胞を単離し、レンチウイルスを用いて不死化させたのち、蛍光タンパク質の安定発現細胞を作製した。さらにこの細胞のARID1Aをノックアウトさせた細胞も作製した。これらの細胞を用いて共培養させた様子を観察したところ、ARID1Aを欠損した細胞はARID1A発現細胞よりも優位に増殖することが明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
平成29年度は、昨年度の続きとなるマウス卵巣表層上皮細胞におけるARID1Aのノックアウト細胞の作製から開始した。この細胞の樹立に時間を要してしまったため、予定していた機能解析の段階まで進むことが出来なかった。そのため、本研究課題の補助事業期間延長申請を行い平成30年度までにin vivoにおけるARID1A欠損細胞の造腫瘍能の検討とARID1A変異細胞と発現細胞の境界で起こる分子生物学的変化を解析することとした。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成29年度で終了予定であった本研究課題の補助事業期間延長申請を行い平成30年度まで行うこととした。平成30年度は交付申請書の29年度の計画に従ってin vivoにおけるARID1A欠損細胞の造腫瘍能を検討する。
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| Causes of Carryover |
平成29年度はin vivoにおけるARID1A欠損細胞の造腫瘍能を検討する予定であったが、マウス卵巣表層上皮細胞におけるARID1Aのノックアウト細胞の作製に時間を要してしまったため計画に遅れが生じてしまった。そのため、平成29年度で終了予定であった本研究課題の補助事業期間延長申請を行い平成30年度まで行うこととした。平成30年度は、当初予定していた平成29年度の研究計画に従って研究を進め、予定通りに予算を執行する。
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