2015 Fiscal Year Research-status Report
単球・マクロファージ系細胞の継代培養法の確立と創傷治癒関連機能の解析
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15K20317
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| Research Institution | Kyorin University |
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Principal Investigator |
菅 浩隆 杏林大学, 医学部, 講師 (60633972)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 創傷治癒 / 単球・マクロファージ系細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト末梢血から採取した単核球分画を，温度応答性ディッシュを用いて培養した。細胞は順調に増殖し，約２週間で継代が可能となった。培養においては，マクロファージコロニー刺激因子を20 ng/mL添加することにより，細胞の増殖が最も促進されることが判明した。
継代においては，ディッシュを室温に約３０分間静置することのみにより細胞がディッシュより剥がれ，容易に継代が可能であった。この方法により，第３継代までの継代培養を確認している。
また，各継代において，フローサイトメトリーによる表面抗原の解析も行った。採取直後は約１５％程度であった単球・マクロファージ系細胞（CD14陽性，CD11b陽性）の割合が，継代を経る毎に増加し，第３継代目ではほぼ１００％に近い割合となっていた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
温度応答性ディッシュによる細胞培養，継代が予想通り可能であることが確認できている。また，末梢血からの細胞採取において有害事象は発生していない。
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| Strategy for Future Research Activity |
データの蓄積を進め，より信頼できる継代培養法のプロトコールを確立させる。また，継代培養して得られた単球・マクロファージ系細胞のサイトカイン分泌について検討する。さらに，温度応答性ディッシュの利点を活かし，細胞の接着が機能に及ぼす影響について検討する。具体的には，細胞が接着している状態と浮遊している状態とを比較し，創傷治癒関連の遺伝子発現，サイトカイン分泌について詳細な比較検討を行う。
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| Causes of Carryover |
当該年度に予定していた実験が順調に進み，使用物品が予定より少なかったため。
また，予定していた旅費の支出がなかったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
今年度に予定している実験に必要な物品の購入に当てる予定。
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