2015 Fiscal Year Research-status Report

セツキシマブ耐性口腔癌におけるPI3K阻害剤併用型セツキシマブ感受性回復法の開発

Research Project

Project/Area Number	15K20528
Research Institution	Okayama University
Principal Investigator	藤田麻里子岡山大学, 大学病院, 助教 (90714535)
Project Period (FY)	2015-04-01 – 2018-03-31
Keywords	アービタックス / 口腔癌 / PIK3CA
Outline of Annual Research Achievements	平成27年度の研究計画として、1：ヒト由来口腔癌細胞株を用いた、アービタックス耐性獲得株の樹立　2：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤（BEZ235、PKI-587）とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討 3：耐性獲得口腔癌細胞株担癌マウスモデルの作製を予定していた。現在、ヒト由来口腔癌細胞株であるHSC4、HSC3、HSC2、SAS、Hep2、HO-1-u-1、Ca9-22の培養を行い、in vitroでのアービタックス感受性の検討としてMTTアッセイを行い、非感受性株、感受性株の選定を行っている。また、上記ヒト由来口腔癌細胞株（HSC4、HSC3、HSC2、SAS、Hep2、HO-1-u-1、Ca9-22）を培養下にて、培養液中にアービタックスを添加し、アービタックスの濃度を漸増し、アービタックス耐性を獲得させ、耐性獲得株の樹立を試みている。また、in vivoでの検討として、上記ヒト由来口腔癌細胞株の培養を行い、マウスへの担癌移植の可否を検討している。HSC4、HSC3、HSC2、SAS、Hep2、HO-1-u-1においては担癌可能であったが、Ca9-22については、背部皮下への生着が困難であり、現時点ではHSC4、HSC3、HSC2、SAS、Hep2、HO-1-u-1株の6株で検討を行う予定としている。さらに、PIK3CA阻害剤としてA66（AdooQ BIOSCIENCE社）を検討中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 当初平成27年度の研究計画として、1：ヒト由来口腔癌細胞株を用いた、アービタックス耐性獲得株の樹立　2：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤（BEZ235、PKI-587）とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討　3：耐性獲得口腔癌細胞株担癌マウスモデルの作製を予定しており、当初の研究予定からはやや遅れているが、良好な結果を得ており、良好な過程にあると考える。現在、口腔癌細胞株7株におけるアービタックス感受性はMTTアッセイを用いてほぼ分別完了となっている。また、上記細胞株のうちアービタックス感受性株を中心にアービタックス耐性獲得株の樹立を試みているが、投与濃度の検討中である。
Strategy for Future Research Activity	平成27年度に予定していた、1：ヒト由来口腔癌細胞株を用いた、アービタックス耐性獲得株の樹立　2：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤（BEZ235、PKI-587）とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討　3：耐性獲得口腔癌細胞株担癌マウスモデルの作製を早急に進めるとともに、平成28年度に予定していた1：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討　2：耐性獲得口腔癌細胞株担癌マウスモデルの作製についても進めていく。現在、PIK3CA阻害剤としてA66（AdooQ BIOSCIENCE社）について検討中である。状況の改善のため、さらなる文献検索を行うとともに、研究協力者である長塚仁（岡山大学医歯薬学総合研究科口腔病理学分野）に指示をあおぎ、研究を進めていくこととする。
Causes of Carryover	当初平成27年度の研究計画として、1：ヒト由来口腔癌細胞株を用いた、アービタックス耐性獲得株の樹立　2：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤（BEZ235、PKI-587）とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討　3：耐性獲得口腔癌細胞株担癌マウスモデルの作製を予定していたが、現在、2：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤（BEZ235、PKI-587）とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討に移行し始めた段階であり、研究内容としては良好な結果が得られているものの、当初の治療計画より遅延傾向にあるため。
Expenditure Plan for Carryover Budget	平成27年度に予定していた、1：ヒト由来口腔癌細胞株を用いた、アービタックス耐性獲得株の樹立　2：耐性獲得株を対象に、in vitroでPI3K阻害剤（BEZ235、PKI-587）とアービタックス併用投与し、耐性解除効果の検討　3：耐性獲得口腔癌細胞株担癌マウスモデルの作製が完了していないため、平成27年度残額は、当初計画していた平成27年度の計画を遂行することに使用する。状況の改善のため、さらなる文献検索を行うとともに、研究協力者である長塚仁（岡山大学医歯薬学総合研究科口腔病理学分野）に指示をあおぎ、研究を進めていくこととする。