2017 Fiscal Year Annual Research Report
Localization of stem cells in osteoarthritis of the temporomandibular and joint repair mechanism
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15K20573
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| Research Institution | Asahi University |
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Principal Investigator |
安田 忠司 朝日大学, 歯学部, 講師 (00410473)
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2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 顎関節 / 幹細胞 / 老化促進マウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1)マウス顎関節における組織幹細胞の局在の探索を胎生期ラべリング法を用いて組織学的に解析する。2) 顎関節症モデルに よる顎関節の組織学的変化と組織幹細胞の動態を免疫染色にて解析する。3) 顎関節をμCTにより解析する。 【結果】老化促進マウス(SAM)のうち変形性顎関節症を自然発症するSAMP8を供試しBrdU (5-bromo-2’-deoxyuridine)を一定期間投与 することにより分裂した細胞をラベルし, 一定期間の無投与期間後(2, 3ヶ月)顎関節部にラベルを保持し続けた細胞（LRCs）の局在を 調べた結果, 関節包, 靭帯関節円板に局在した。また間葉系幹細胞マーカーであるSTRO-1, CD146抗体を用い蛍光免疫二重染色を施しLRCsとするのを確認した。SAMP8の顎関節は軟骨表面が粗造になり下顎頭の形態変化を認めた。また下顎枝の長さが対照群であるSAMR1 と比較し減少した。これらの結果から顎関節症モデルによる組織学的変化と組織幹細胞の動態を解明するため、不正咬合モデルマウスを作製し顎関節症, 変形性関節症を惹起させ顎関節の形態異常と組織幹細胞の動態を解明した。方法はマウス臼歯にレジンを添加させ咬合高径の過高させた。このモデル系ラットに胎生期ラベリング法を用いたのち顎関節部を摘出し固定, 脱灰後, 厚さ5μmの薄切切片を作成し顎関節の組織学的変化および細胞増殖活性(PCNA), 細胞死(TUNEL), LRCs の局在の経時的な変化を観察した結果、顎関節後縁に関節軟骨の破壊を認め、PCNA, TUNEL陽性細胞の発現と一致した。また, 間葉系幹細胞マーカーであるSTRO-1, CD146抗体を用い蛍光免 疫二重染色を施しLRCsと一致するか確認した結果、STRO-1, CD146抗体陽性細胞とLRCsは対照群と比較し有意に減少した。
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