2016 Fiscal Year Annual Research Report
Establishment of a novel cell-based assay for detection of potential drug-induced liver injury by considering immune- and inflammatory-related factors
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15K21057
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
織田 進吾 名古屋大学, 医学系研究科, 特任助教 (10725534)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 肝障害 / 薬物代謝 / 炎症反応 / 細胞アッセイ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
薬剤性肝障害を非臨床で予測するために、肝実質細胞における細胞死等のパラメーターを指標とした試験系が発案されてきたが、十分な予測性を得られておらず、新たな角度からの薬剤性肝障害評価系の構築が求められている。反応性代謝物と免疫反応の活性化は薬剤性肝障害の発症に重要であることが示唆されている。本研究では、in vitro薬剤性肝障害予測評価系として、薬物代謝反応を考慮し、免疫および炎症関連遺伝子発現量をマーカーとすることの有用性について検証した。
96種類の薬物をHepG2または分化HepaRG細胞に24時間処置し、その培養上清をHL-60細胞に暴露させた。24時間後、HL-60細胞におけるMCP-1, S100A9, IL-1B, IL-8及びTNF mRNA発現量を測定した。各mRNA発現量の薬剤性肝障害予測マーカーとしての有用性はROC曲線に基づき評価した。さらに、S100A9, IL-1B及びIL-8発現量において、各々cut-off値以上を示す薬剤にはscore (+1点) を与え、3遺伝子におけるscoreの総和値 (immune inducible score, IIS) を算出し、その値の薬剤性肝障害予測性も同様に評価した。
HepaRG培養上清を暴露させたHL-60 (HepaRG/HL-60) におけるIL-8発現量のROC-AUCは最も高値 (0.758) であり、次いでHepaRG/HL-60におけるIL-1B (ROC-AUC = 0.726) による予測性が良好であった。いずれの遺伝子においてもHepaRG培養上清を暴露させた方がHepG2よりもAUC-ROCが高値傾向にあることから、薬物代謝を考慮することで予測性が向上することが示唆された。HepG2とHepaRGのIISの総和値によるROC-AUCは高値 (0.819) であり、複数のパラメーターを考慮することで薬剤性肝障害の予測性が向上することが明らかとなった。薬剤性肝障害のin vitro予測試験系として、免疫および炎症関連遺伝子発現量をマーカーとした試験系の可能性を示した。
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Research Products
(16 results)
