2015 Fiscal Year Research-status Report
特定波長光の照射・遮蔽による悪性黒色腫細胞の増殖コントロール
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15K21153
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Research Institution | Kobe University |
Principal Investigator |
高須 啓之 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (40566022)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | メラノーマ / メラノサイト / 光受容 |
Outline of Annual Research Achievements |
皮膚組織における光受容についてはこれまで網膜に発現しているロドプシンなどの発現が示唆されてきたが、数少ない報告であった。われわれはメラノサイトの光受容とメラノジェネシスに注目した。これまでメラノジェネシスには紫外線による刺激により誘導されるtされてきたが、光シグナル受容体による直接的な光受容については示されていなかった。われわれはこれまでにヒト皮膚においてOpn4(メラノプシン)が発現していることを明らかとした。本研究において、メラノサイトにおいてもOpn4が発現していることを示した。まず、ヒト皮膚組織よりメラノサイト選択培地において単離培養を行った。この単離された細胞よりmRNAを抽出し、RT-PCRを行った。PCR産物をクローニングし、塩基配列解析を行った。その結果、メラノプシンmRNAの発現が確認された。また、スプライシングバリアントも存在した。次に、ウェスタンブロッティング法によりタンパク質レベルでの発現も確認された。 セカンドメッセンジャーであるGnaqの同時発現も検討した。その結果、組織学的にも分子生物学的にもOpn4とGnaqの同時発現が確認された。 現在、ERKのリン酸化を指標としたELISA法により、光照射によるリン酸化の検討を行っている。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
実験系の確立などおおむね当初の計画通りに進んでいる。
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Strategy for Future Research Activity |
メラノーマ細胞の培養を行い、メラノプシンの発現を解析する。また、手術検体を組織学的に検討する。
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Causes of Carryover |
おおむね使用した。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
細胞培養などに用いる。
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