Can the cell surface marker detected by our new culture system be a therapeutic target for inflammatory bowel disease (IBD)?

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K21179
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 高原 政宏 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (80738427)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: CD4+T細胞 / CD25 / 制御性T細胞

Outline of Annual Research Achievements

申請者は、CD4+CD45Rbhigh移入腸炎マウスモデルの腸管粘膜内CD4+T細胞(LPCD4+T細胞)から生存能、腸炎惹起能の高い細胞を抽出する新規培養法を開発し、これらの細胞にCD25陽性細胞が多数存在することを同定した。本研究は、CD25陽性T細胞が、炎症性腸疾患の治療ターゲットとなりうるかどうかを検証することを目的とした。
CD25陽性T細胞には、細胞内転写因子、Foxp3陽性の制御性T細胞の分画が含まれているが、我々が開発した培養法で同定したCD25陽性T細胞には、この分画は含まれていない。このため、目的の研究を行うためには、この分画を除く必要があった。Foxp3の検出には、細胞内固定を要するため、生きたままの状態で検出できないこと、また、時間もかかることから、今回、Foxp3レポータマウスを入手し、研究を行った。
まず、このマウスを使って、移入腸炎マウスを作成した。腸炎発症後に、このマウスのLPCD4+T細胞を抽出し、刺激下で培養し、炎症性サイトカインの分泌能を制御性T細胞の分画を除いたCD25陽性、陰性T細胞の分画で調べた。しかしながら、このモデルの主要な炎症性サイトカインであるIFN-γとIL-17Aの分泌能においては、両分画に明確な差はなかった。また、LPCD4+T細胞を制御性T細胞の分画を除いたCD25陽性、陰性T細胞で分取し、腸炎惹起能の比較や、遺伝子、蛋白質の発現の違いを比較しようと試みたが、分取後の純度がCD25陽性T細胞で非常に悪く、評価困難であった。
今後、他の炎症性サイトカインや抗アポトーシス分子を測定し、両分画に差がないかどうか、また、腸管粘膜のリンパ球では、今回の目的の分画を分取するのが難しいため、比較的分取しやすい脾臓細胞のリンパ球を使用して、評価が出来ないかどうかを検討中である。