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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Identification of neural pathway for suckling stimulus using kisspeptin cell specific retrograde tracing

Research Project

Project/Area Number 15K21286
Research InstitutionKyoto Prefectural University of Medicine

Principal Investigator

山田 俊児  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (40454079)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2017-03-31
Keywords偽型狂犬病ウイルス / AAV / 弓状核 / トレーサー / cre recombinase
Outline of Annual Research Achievements

生殖機能の制御因子としてキスペプチン神経が注目されている。生殖機能は授乳による吸乳刺激、低栄養、ストレス等の様々な因子に制御されることから、キスペプチン神経に対する入力の解明は生殖制御メカニズムの理解を深めるために重要である。キスペプチン神経に入力する神経の探索のため、偽型狂犬病ウイルス (pRABV) を用いた「起始細胞特異的逆行性トレーシング」を計画し、昨年度までにpRABVを作製するためのプラスミドとCre発現細胞を修飾するためのアデノ随伴ウイルス (AAV) を準備した。
本年度は、pRABVのプラスミドを用いて、EnvA-HEPΔG-GFP (HEP株狂犬病ウイルスを構成するGタンパクがGFPに置換されEnvAでコーティングされてTVA受容体を含む細胞にしか感染しないpRABV)を作製した。次に、neuropeptideY (NPY) 神経にCre recombinase (Cre) を発現するマウスの弓状核にAAV-FLEX-TVA-mCherry (Cre依存性にTVA受容体を発現させるAAV) を投与し、その後作製したEnvA-HEPΔG-GFPを投与することで、作製したAAVやpRABVの機能をin vivoで評価した。
Creを発現していないマウスへの両ウイルス投与ではGFPシグナルが見られなかった。一方、NPY-Cre miceへの投与では投与部位近傍にのみTVA受容体発現が見られた。さらに投与部位から離れた視索前野や室傍核ならびに扁桃体にGFP陽性細胞が見られた。これらのことから作製したウイルスがCreもしくはTVA依存性に機能する事、ならびに弓状核近傍のNPY神経には視索前野や室傍核ならびに扁桃体から入力することが明らかとなった。
今後、キスペプチン神経にCreを発現するマウスで同様の実験を行いその投射神経を明らかにする予定である。

  • Research Products

    (4 results)

All 2017 2016

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Immunohistochemical profiling of estrogen-related receptor gamma in rat brain and colocalization with estrogen receptor alpha in the preoptic area.2017

    • Author(s)
      Tanida T, Matsuda KI, Yamada S, Kawata M, Tanaka M.
    • Journal Title

      Brain Research

      Volume: 1659 Pages: 71-80

    • DOI

      doi: 10.1016/j.brainres.2017.01.024.

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] ラット分界条床核におけるエストロゲン受容体α発現細胞の特性2017

    • Author(s)
      山田俊児、井上海平、田中雅樹
    • Organizer
      第122回日本解剖学会総会・全国学術集会
    • Place of Presentation
      長崎
    • Year and Date
      2017-03-28 – 2017-03-30
  • [Presentation] 授乳期における弓状核Kiss1遺伝子制御メカニズムの解明2016

    • Author(s)
      山田俊児、杉本有沙、上野山賀久、谷田任司、松田賢一、河田光博、束村博子、田中雅樹
    • Organizer
      第43回日本神経内分泌学会学術集会
    • Place of Presentation
      静岡
    • Year and Date
      2016-10-14 – 2016-10-15
  • [Presentation] 授乳期におけるKiss1発現抑制とヒストンアセチル化2016

    • Author(s)
      山田俊児、田中雅樹
    • Organizer
      第13回GPCR研究会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2016-05-13 – 2016-05-14

URL: 

Published: 2018-01-16  

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