Diagnostics of carcinogenic risk in ulcerative colitis targeting a prostaglandin transporter

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K21288
• Research Institution: Osaka City University
• Principal Investigator: 大谷 恒史 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (30597555)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: プロスタグランジントランスポーター / プロスタグランジン / 炎症発癌 / 大腸癌

Outline of Annual Research Achievements

8週齢のC57BL/6Jマウスを用いてazoxymethane (12 mg/kg) を腹腔内投与し、14日目から21日目と35日目から42日目に3% dextran sulfate sodiumを自由飲水させて大腸炎症発癌モデルを作成した。炎症部位および発癌部位におけるprostaglandin (PG) E2誘導酵素であるcyclooxygenase (COX)-2、PGE2代謝酵素である15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase (15-PGDH)、細胞内への膜輸送担体であるPG transporter (PGT)、外向輸送を司るmultidrug resistance associated protein (MRP) 4の発現動態について、real-time RT-PCR法を用いて検討した。56日目に解剖し発癌部位について検討した結果、COX-2、MRP4の発現亢進および15-PGDH、PGTの発現低下が見られた。さらにwestern blot法と免疫組織化学染色法を用いて検討した結果、大腸癌部位においてはPGTの発現は低下していた。ELISA法を用いて大腸癌部位におけるPGE2含有量を測定した結果、細胞内のPGE2含有量は増加していた。
またヒト樹立大腸癌細胞株SW480、HT29細胞のPGT遺伝子をsiRNAによってノックダウンすると15-PGDHの発現は増加し、一方で15-PGDH遺伝子をsiRNAによってノックダウンするとPGTの発現は増加した。これらのことからPGTと15-PGDHの間には機能連関が存在することが示唆された。またSW480、HT29細胞の培養上清にTNF-α (10ng/ml) を添加した結果、PGTの発現の低下とともに大腸癌細胞内のPGE2含有量は増加し、IκBαのリン酸化およびNFκBの核内移行が生じた。