2019 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of double-strand RNA virus replication(Fostering Joint International Research)
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15KK0281
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
松尾 栄子 神戸大学, 農学研究科, 助教 (40620878)
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| Project Period (FY) |
2016 – 2019
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| Keywords | 二本鎖RNAウイルス / 遺伝子改良法 / VP6 / ウイルス封入体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度はまず、ダニ（アカコッコマダニ）をベクターとするムコウイルス（MUV）の遺伝子改変法（RGシステム）を樹立し、赤色蛍光タンパク質mCherryおよび、緑色蛍光タンパク質EGFPやUnaGで標識したMUVの作出に成功した。これらのウイルスと、蛍光標識イバラキウイルス（IBAV）および昨年度に作出した蛍光標識ブルータングウイルス（BTV）を用いて、共感染実験を行った。「同属ウイルスの共通性・異種性」を明らかにするため、まずウイルス複製の場であるウイルス封入体（VIB）に着目し、同属他種のウイルス共感染時における、VIB形成について解析した。IBAVとBTVが共感染した細胞ではIBAVとBTVはVIBを常に共有した。一方、IBAVとMUVが共感染した細胞ではそれぞれがVIBを形成する場合が多いが、共有した場合は、VIBのサイズが常に大きいことが分かった。次に、「ゲノムを取り込むことはできないが、構造を維持し、粒子中に取り込まれるVP6」を持つIBAVを精製した。VP6に挿入したタグによって、IBAV粒子にVP6が取り込まれていることを確認した。また、昨年度に引き続き、VP6のVP3結合領域の解析を行なった。MUVのVP6はIBAVのVP3との結合が非常に弱い。ヌカカをベクターとするBTVやIBAV VP6のVP3結合領域の配列はRATAYF であるが、MUV VP6の相同領域の配列はQAHILFと、二次構造は似ているが、配列は大きく異なっている。そこで、MUV VP6のVP3結合領域と考えられる部分をIBAV VP6のVP3結合領域と入れ替えたが、結合能力は改善しなかった。このことから、VP6のVP3結合領域は１箇所だけではないことが示唆された。最後に、マウス肝臓細胞でのMUVの増殖性を調べたところ、IBAVとは違い、MUVは増殖可能であることが明らかになった。
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[Int'l Joint Research] London School of Hygiene & Tropical Medicine(英国)2017
Year and Date
2017-02-28 – 2017-04-14 | 2017-09-232017-10-12 | 2017-12-132018-01-23 | 2019-09-182019-10-15 | 2020-01-092020-02-09
Country Name
UNITED KINGDOM
Counterpart Institution
London School of Hygiene & Tropical Medicine
Co-investigator Overseas
Polly Roy
Department
Infectious & Tropical Diseases
Job Title
Professor
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