2018 Fiscal Year Annual Research Report
Intracellular signaling machinery that regulates endocytosis and uptake of exogenous factors(Fostering Joint International Research)
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15KK0290
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
大場 雄介 北海道大学, 医学研究院, 教授 (30333503)
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2016 – 2018
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| Keywords | 蛍光イメージング / シグナル伝達 / エンドサイトーシス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
3月～9月の期間米国海洋生物学研究所（Marine Biological Laboratory, MBL）に滞在し、全反射型蛍光偏光顕微鏡の基礎を学び、その構築法を習得した。既存の観察側の偏光分光に加え、励起側の偏光を制御する光学系を開発し、その光学系を実際に構築した。また、蛍光タンパク質を細胞膜との相対角度が常に一定になるように固定し、蛍光タンパク質の双極子の方向が細胞膜のトポロジーに対して一定に配向するバイオセンサーを構築した。このバイオセンサーを発現する細胞膜を上記蛍光偏光顕微鏡で観察したところ、細胞膜なダイナミックな微小な変形、エンドサイトーシスの初期の膜変形などを、蛍光強度の変化として捉えることが可能になった。これらの変化はすべてが光学顕微鏡の回折限界以下の領域で生じる現象であり、新しい超解像観察技術へと発展が期待できる。さらに、膜への局在化シグナルの一部に脂質認識部位を導入することで、膜の組成変化を蛍光偏光の変化として捉えるバイオセンサーも構築した。
帰国後、MBL訪問研究者と連絡を取りながら光学素子と部材の選定を行い、必要機器を入手した。その後、自らの手で全反射型蛍光偏光顕微鏡を研究室にセットアップし、稼働させた。2月にはMBLの受け入れ研究者を日本に招き、セットアップした顕微鏡をon siteで確認した。また、意見交換と今後の研究展開について協議し、新規蛍光偏光顕微鏡のプランを共同で立案した。現在はその新しい蛍光変更顕微鏡のセットアップを行っており、まもなく稼働予定である。
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[Journal Article] A peptide derived from phosphoinositide 3-kinase inhibits endocytosis and influenza virus infection.2019
Author(s)
Yoichiro Fujioka, Aya O. Satoh, Kosui Horiuchi, Mari Fujioka, Kaori Tsutsumi, Junko Sasaki, Prabha Nepal, Sayaka Kashiwagi, Sarad Paudel, Shinya Nishide, Asuka Nanbo, Takehiko Sasaki, Yusuke Ohba
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Journal Title
Cell Structure and Function
Volume: in Press
Pages: in Press
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] A Sialylated Voltage-Dependent Ca2+Channel Binds Hemagglutinin and Mediates Influenza A Virus Entry into Mammalian Cells2018
Author(s)
Yoichiro Fujioka, Shinya Nishide, Toyoyuki Ose, Tadaki Suzuki, Izumi Kato, Hideo Fukuhara, Mari Fujioka, Kosui Horiuchi, Aya O. Satoh, Prabha Nepal, Sayaka Kashiwagi, Jing Wang, Mika Horiguchi, Yuko Sato, Sarad Paudel, Asuka Nanbo, Tadaaki Miyazaki, Hideki Hasegawa, Katsumi Maenaka, Yusuke Ohba
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Journal Title
Cell Host & Microbe
Volume: 23
Pages: 809-818.e5
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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