2004 Fiscal Year Annual Research Report
シナプス後部に局在するグリア因子受容体,ssLRP,の機能の解明
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16047211
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
鈴木 龍雄 信州大学, 医学研究科, 教授 (80162965)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田 慶宝 信州大学, 医学研究科, 助手 (40324264)
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| Keywords | postsynaptic density / astrocyte / LDL receptor-related protein / cholesterol / calmodulin kinase II / synpatogenesis / PDZ domain / knockout mouse |
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| Research Abstract |
シナプスを取り巻くアストロサイトから分泌される因子(コレステロールなど)によってシナプスの形成と機能が修飾されると報告されている.我々は,シナプス後部タンパク質,ssLRP(現在LRP4として名称が確定した)をコードする完全長遺伝子をクローニングした.LRP4はLDL receptor familyのメンバーであり,シナプス後部にターゲットすると考えられた.LDL receptor familyのメンバーの機能として一般に,コレステロールの代謝,その他のリガンドの受容と取り込み,およびそれに伴う細胞内へのシグナル伝達である.我々は,LRP4がグリアからの放出因子のシナプス後部側の受容体で,グリア-シナプス相関の重要な担い手の一つでははないかと考え,LRP4について研究を行うことにした.
今年度はLRP4の基本的な性質について明らかにした.また,LRP4欠損マウスの作出に取りかかった.
(1)1種の抗LRP4抗体(cytosolic C末部分をエピトープとした)を作成した.このタンパク質はCos7細胞に発現させた全長LRP4を認識したが,脳ホモジェネートおよび細胞下分画においては,全長サイズのタンパク質はごく微量で,むしろ低分子量のタンパク質を認識した.
(2)LRP4C末端部にPDZ domain binding motifが存在していて.それにより,PSD scaffold proteinであるPSD-95やSAP97と結合した(pulldownやimmunoprecipitationにて証明>.またその相互作用はCaMKIIによるLRP4のリン酸化により抑制されることを証明した.
(3)LRP4の内在性のグリア由来のリガンドを同定する為にLRP4のORF全長配列を組み込んだベクターを作成した、Cos7では全長LRP4タンパク質の発現が見られた、現在LRP1 nullのHEK293 cellへのstableな発現系を確立中である.これを用いてリガンドの同定を行う予定である(ワシントン大学Dr Buとの共同).
(4)ノックアウトマウスの作成の為のターゲッティングベクターはほぼ完成まで近づいた.
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Research Products
(6 results)
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[Journal Article] BAALC 1-6-8 protein is targeted to postsynaptic lipid rafts by its N-terminal miristoylation and palmitoylation, and interacts with a, but not b, subunit of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II.2005
Author(s)
Wang X., Tian Q-B., Okano A., Sakagami H., Moon Il., Kondo H., Endo S., Suzuki T
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Journal Title
J.Neurochem. 92
Pages: 647-659
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[Journal Article] A novel scaffold protein, TANC, possibly a rat homolog of Drosophila rolling pebbles (rols), forms a mufti-protein complex with various postsynaptic density proteins.2005
Author(s)
Suzuki T., Li W., Zhang J-P., Tian Q-B., Sakagami H., Usuda N., Kondo H., Fujii T., Endo S.
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Journal Title
Eur.J.Neurosci. 21
Pages: 339-350
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[Journal Article] Brain-specific potential guanine nucleotide exchange factor for Arf, synArfGEF(Po), is localized to postsynaptic density.2004
Author(s)
Inaba Y., Tian Q-B., Okano A., Zhang J-P., Sakagami H., Miyazawa S, Li W., Komiyama A., Inokuchi K., Kondo H., Suzuki T.
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Journal Title
J.Neurochem 89
Pages: 1347-1357
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