複製遺伝子のマスター制御因子DREFと遺伝学的相互作用する因子の同定と機能解析

2004 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16370004
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Kyoto Institute of Technology
• Principal Investigator: 山口 政光 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (00182460)
• Keywords: 細胞増殖 / 転写因子 / DREF / 転写調節エレメント / 複眼形態異常 / 唾腺染色体 / クロマチン免疫沈降法 / 複製関連遺伝子

Research Abstract

細胞増殖は、生物のもつ最も重要な機能のひとつであるが、増殖に関わる遺伝子産物の総体や、それらの発現を統括的に調節する制御機構、またそれらと発生・分化との関わりについてはほとんどわかっていない。DREFは、ショウジョウバエ複製関連遺伝子プロモーターに共通して存在する転写調節エレメントであるDREに特異的に結合し、それらの遺伝子の転写を活性化する転写因子として発見された。これまでにDREF遺伝子導入ショウジョウバエ系統を樹立し、DREFをショウジョウバエ複眼原基で過剰発現させると、DNA合成の誘導と光受容細胞分化の抑制、さらにアポトーシスの誘導が起こり、複眼形態異常(rough eye 表現型)が引き起こされる事を明らかにしてきた。またDREFが誘導するrough eye 表現型を抑圧または増強する染色体欠失領域については、X染色体、第2染色体、第3染色体上でそれぞれマップしていた。
本年度は特に第2染色体上の欠失領域内にP因子が挿入されている変異系統を入手し、DREF過剰発現系統と網羅的に交配した。その結果rough eye表現型を抑圧する突然変異として、細胞増殖に関与するfat遺伝子、翻訳開始因子eIF3p40とeIF4a遺伝子、転写関連因子little imaginal discs、brunched croked legs、また機能がわからないCG15636遺伝子など計18個を同定した。一方、rough eye表現型を増強する突然変異として、cbt、star、pigeonなど計6個を同定した。そのうちCG15636遺伝子の5‘上流域には4つのDRE配列が存在しており、DREFの標的遺伝子である可能性が高い。抗DREF抗体を用いた唾腺染色体の免疫染色法では、CG15636遺伝子の存在する第2染色体左腕25A1領域にシグナルが見られた。また抗DREF抗体を用いたクロマチン免疫沈降法でも、CG15636遺伝子5‘上流域にDREFが結合していることを示唆する結果が得られた。

Research Products

• [Journal Article] Drosophila damaged DNA binding protein 1 (D-DDB1) is an essential factor for development. (2004)
  • Author(s): Takata, K., Yoshida, H., Yamaguchi, M., Sakaguchi, K.
  • Journal Title: Genetics 168 Pages: 855-865
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [Journal Article] DREF is required for EGFR signaling during Drosophila wing vein development. (2004)
  • Author(s): Yoshida, H., Kwon, E., Hirose, F., Otsuki, K., Yamada, M., Yamaguchi, M.
  • Journal Title: Genes to Cells 9 Pages: 935-944
  • Description: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [Journal Article] Characterization of dRFX2, a novel RFX family protein in Drosophila. (2004)
  • Author(s): Otsuki, K., Hayashi, Y., Kato, M., Yoshida, H., Yamaguchi, M.
  • Journal Title: Nucleic Acids Res. 32 Pages: 5636-5648
  • Description: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [Journal Article] Armadillo/ Pangolin regulates PCNA and DREF promoter activities. (2004)
  • Author(s): Kwon E., Hayashi, Y.Otsuki, K., Hirose, F., Nishida, Y., Yoo, M.-A., Yamaguchi, M.
  • Journal Title: Biochem.Biophys.Acta. 1670 Pages: 1024-1031
• [Journal Article] Transcriptional regulation of the Drosophila caudal homeobox gene by the DRE/DREF system. (2004)
  • Author(s): Choi, Y.-J., Choi, T.-Y., Yamaguchi, M., Matsukage, A., Kim.Y.-S., Yoo, M.
  • Journal Title: Nucleic Acids Res. 32 Pages: 3734-3742
• [Journal Article] Genetic Link between p53 and genes required for formation of the zonula adeherens junction. (2004)
  • Author(s): Yamaguchi, M., Hirose, F., Inoue Y.H., Ohno, K., Yoshida, H., et al.
  • Journal Title: Cancer Science 95 Pages: 436-441
• [Book] 発生における細胞増殖制御(竹内隆・岸本健雄編) (2004)
  • Author(s): 山口政光, 加藤容子
  • Total Pages: 198
  • Publisher: シュプリンガーフェアラーク東京