2005 Fiscal Year Annual Research Report
日本と中国の完全甘ガキ品種群の発生過程とタンニン蓄積制御機構の分子生物学的解明
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16380025
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
米森 敬三 京都大学, 農学研究科, 教授 (10111949)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山田 昌彦 果樹研究所, ブドウ・カキ研究部, 室長 (00355439)
田尾 龍太郎 京都大学, 農学研究科, 助教授 (10211997)
北島 宣 京都大学, 農学研究科, 助教授 (70135549)
神崎 真哉 近畿大学, 農学部, 講師 (20330243)
羽生 剛 京都大学, 農学研究科, 助手 (60335304)
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| Keywords | タンニン生合成 / SSH分析 / AFLPマーカー / プロアントシアニジン / 羅田甜柿 / 完全甘ガキ |
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| Research Abstract |
昨年度の実験結果より、中国の完全甘ガキ‘羅田甜柿'ではタンニン合成のためのフラボノイド生合成系遺伝子(PAL、CHS、F3H、DFR)の発現が日本の渋ガキ品種同様、果実発育後期まで維持されており、‘羅田甜柿'のタンニン生成制御機構が日本の完全甘ガキとは全く異なっていることが明らかとなった。さらに‘羅田甜柿'の完全甘ガキ形質が優性であることが確かめられ、タンニン生成を抑制する優性遺伝子を‘羅田甜柿'がヘテロでもっている可能性が強く示唆された。そこで本年度は、この遺伝子の働きを詳しく調査することを目的として、‘羅田甜柿'のこの優性形質に連鎖しているマーカーをAFLP法により探索するとともに、‘羅田甜柿'と日本の完全甘ガキ品種‘太秋'の交雑後代(F_1)で分離した完全甘ガキと渋柿を用いたmRNAのサブトラクション(SSH)分析を実施し、フラボノイド合成後のタンニン生合成に関与すると考えられる新規の遺伝子の同定を試みた。
その結果、384通りのプライマーの組み合わせによるAFLP分析により、94組でバルク間のバンドパターンに差異が認められ、最終的に3つのプライマー組によって得られたバンドが‘羅田甜柿'の完全甘ガキ形質に連鎖していることが確かめられた。現在、これらのプライマーセットにより見いだしたAFLPマーカーの塩基配列を解析中であり、この塩基配列情報をもとに‘羅田甜柿'のゲノムライブラリーからゲノミッククローンを単離して、遺伝子単離のための基礎データを調査していく予定である。また、SSH分析の結果から、SCPL、DHQase-SORaseなどこれまでタンニン生成に関与が報告されていない遺伝子が‘羅田甜柿'から単離され、これらの機能解析を進めている。
さらに、‘羅田甜柿'のタンニン物質が日本の完全甘ガキとは異なり、かなり高分子のプロアントシアニジンで構成されていることがゲル濾過クロマトグラフィーにより確かめられ、その特異性がさらに明確となった。
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