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2004 Fiscal Year Annual Research Report

結核菌由来ヒトT細胞エピトープの同定とマルチエピトープDNAワクチンの開発

Research Project

Project/Area Number 16390130
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Research InstitutionHamamatsu University School of Medicine

Principal Investigator

永田 年  浜松医科大学, 医学部, 助教授 (90275024)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 小出 幸夫  浜松医科大学, 医学部, 教授 (30126809)
内嶋 雅人  浜松医科大学, 医学部, 助手 (20252174)
青枝 大貴  浜松医科大学, 医学部, 助手 (10324344)
KeywordsDNAワクチン / 結核 / MPT51 / CTLエピトープ / HLA-Aトランスジェニックマウス
Research Abstract

1)DNAワクチン用プラスミドの構築
結核菌由来Ag85A,Ag85B,MPT51,ESAT-6,HSP65遺伝子を入手または結核菌ゲノムよりPCR法により単離した。これらの遺伝子を用いてDNAワクチン用発現プラスミドを構築した。
2)H2クラスIKO/HLA-A^*2402トランスジェニックマウスの作製
H2クラスIKO/HLA-A^*0201トランスジェニックマウスは入手済みであり、日本人に多いHLA-A^*2402を発現するH2クラスIKO/HLA-A^*2402トランスジェニックマウスは作製中である。HLA-A^*2402発現プラスミドをβ2-ミクログロブリンKOマウス胚に導入し、PCR法によりH2クラスIKO/HLA-A^*2402トランスジェニックマウスのスクリーニングをしたところ5系統のマウスで遺伝子の導入を確認した。
3)MPT51CTLエピトープの検索
MPT51については、H:LA-A^*0201トランスジェニックマウスへのMPT51DNAワクチン投与により、MPT51p51-60ペプチド特異的IFN-γ産生を認め、このペプチドがHLA-A^*0201拘束性CTLエピトープである可能性を示した。このことは、この実験系がCTLエピトープの同定に有効であることを示すものである。
4)MPT51p51-60ペプチドの解析
i)細胞傷害試験MPT51DNAワクチン免疫脾細胞をエフェクター細胞、ペプチドパルスT2細胞(HLA-A^*0201)を標的細胞としてクロミウム遊離法で細胞傷害試験を検討中である。
ii)ペプチド結合試験MPT51p51-60ペプチドが実際にHLA-A^*0201分子に結合することを、ヒト由来のTAP欠損培養細胞であるT2細胞を用い検討中である。
iii)HLA-A^*0201陽性の結核患者末梢血中のMPT51p51-60ペプチド特異的T細胞の検出
さらに国立天竜病院の協力のもとに、HLA-A^*0201陽性の結核患者末梢血を採取しペプチド特異的なIFN-γ産生があるかどうか検討中である。

  • Research Products

    (8 results)

All 2005 2004

All Journal Article (8 results)

  • [Journal Article] Interferon-y overcomes low responsiveness of myeloid dendritic cells to CpG-DNA.2005

    • Author(s)
      Uchijima M, Nagata T, Aoshi T, Koide Y.
    • Journal Title

      Immunolgy and Cell Biology 83

      Pages: 92-95

  • [Journal Article] Expression mapping by retroviral vector for CD8^+ T cell epitopes : definition of a Mycobacterium tuberculosis peptide presented by H2-D^d.2005

    • Author(s)
      Aoshi T, Suzuki M, Uchijima M, Nagata T, Koide Y.
    • Journal Title

      Journal of Immunological Methods (in press)

  • [Journal Article] Induction of protective immunity against Mycobacterium tuberculosis by recombinant attenuated self-destructing Listeria monocytogenes strains harboring eukaryotic expression plasmids for Ae85 complex and MPB/MPT51.2004

    • Author(s)
      Miki K, Nagata T, Tanaka T, Kim Y-H, Uchijima, M, Ohara N, Nakamura S.
    • Journal Title

      Infection and Immunity 72(4)

      Pages: 2014-2021

  • [Journal Article] Plasmid encoding interleukin-4 in the amelioration of murine collagen-induced arthritis.2004

    • Author(s)
      Kageyama Y, Koide Y, Uchijima M, Nagata T, Yoshida A, Aoshi T, Miura T, Nagafusa T, Nagano A.
    • Journal Title

      Arthritis and Rheumatitis 50

      Pages: 968-975

  • [Journal Article] Identification of H2-D^d- and H2-A^d-restricted T-cell epitopes on a novel protective antigen, MPT51, of Mycobacterium tuberculosis.2004

    • Author(s)
      Suzuki M, Aoshi T, Nagata T, Koide Y.
    • Journal Title

      Infection and Immunity 72(7)

      Pages: 3829-3837

  • [Journal Article] Cytotoxic T-lymphocyte-, and helper T-lymphocyte-oriented DNA vaccine.2004

    • Author(s)
      Nagata T, Aoshi T, Uchijima M, Suzuki M, Koide Y.
    • Journal Title

      DNA and Cell Biology 23

      Pages: 93-106

  • [Journal Article] Butyrate suppresses hypoxia-inducible factor-1 activity in intestinal epithelial cells under hypoxic conditions.2004

    • Author(s)
      Milk K, Unno N, Nagata T, Uchijima M Konno H, Koide Y, Nakamura S.
    • Journal Title

      Shock 22

      Pages: 446-452

  • [Journal Article] Attenuated bacteria as transfer vehicles of DNA vaccines.2004

    • Author(s)
      Nagata T, Miki K, Koide Y.
    • Journal Title

      Recent Research Development of Biophysics and Biochemstry 4

      Pages: 189-207

URL: 

Published: 2006-07-12   Modified: 2016-04-21  

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