2004 Fiscal Year Annual Research Report
デュシェンヌ型筋ジストロフィーの核酸医薬治療に関する細胞生物学的研究
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16390301
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
松尾 雅文 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10157266)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹島 泰弘 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (40281141)
八木 麻理子 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (60362787)
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| Keywords | ジストロフィン / エクソンスキッピング / DMD / アンチセンス |
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| Research Abstract |
デュシェンヌ型筋ジストロフィー(DMD)の治療法としてエクソンのスキッピングを誘導する方法が注目されている。私達はアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いてジストロフィン遣伝子のエクソンのスキッピングを誘導することに世界で初めて成功した。最近、新しく開発された修飾核酸(ENA)からなるアンチセンスオリゴヌクレオチド(RNA/ENAオリゴ)が、従来の化合物に比較して飛躍的に高いエクソンスキッピング誘導能を有することを示唆する結果を世界に先駆けて得た。
本研究は、RNA/ENAオリゴの実用化を世界で初めて図るために以下の細胞生物学的研究を行った。(1)培養筋細胞を用いたエクソンスキッピング誘導能を有するRNA/ENAオリゴのスクリーニング(2)RNA/ENAオリゴを導入した患者培養筋細胞におけるジストロフィン発現の免疫組織化学的検討(3)ノックアウトマウスを用いたRNA/ENAオリゴの投与効果の解析。
その結果、(1)培養筋細胞を用いた有効なRNA/ENAオリゴのスクリーニングにおいて、ジストロフィン遺伝子の新たなエクソンのスキッピングを誘導するRNA/ENAキメラの同定に成功した。(2)患者由来培養筋細胞を用いた検討では、一部の患者由来筋細胞でジストロフィンの発現を確認した。(3)ノックアウトマウスでの治療効果検証においては、ジストロフィン遺伝子のエクソンを欠失したDMDのモデルとなるノックアウトマウスに、RNA/ENAオリゴを投与し、投与したマウスの骨格筋のジストロフィンmRNAを解析し、標的とするヱクソンのスキッピングが誘導されたことを確認しつつある。
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