2006 Fiscal Year Annual Research Report

軟骨形成マスター分子SOXトリオの上流、下流、修飾分子の解明のための戦略的研究

Research Project

Project/Area Number	16390430
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	池田敏之東京大学, 医学部附属病院, 客員教員 (80322759)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鄭雄一東京大学, 大学院医学系研究科, 助教授 (30345053) 川口浩東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (40282660) 中村耕三東京大学, 医学部附属病院, 教授 (60126133) 松原全宏埼玉医科大学, 救命救急センター, 助手 (40361498)
Keywords	軟骨分化 / SOX9 / SOX6 / S100A1 / S100B / p63 / SNX19
Research Abstract	SOXトリオの下流分子をマイクロアレイによりスクリーニングし候補分子を解析する中で、S100A1,S100Bが軟骨組織に高発現するSOXトリオの直接の転写ターゲットであり、SOXトリオによる軟骨細胞の後期肥大分化の抑制作用を担う主分子であることを明らかにした。ヒトII型コラーゲン遺伝子のSOX9結合エンハンサーと蛍光レポーターを組み合わせた軟骨分化リアルタイムモニタリング細胞株ATDC5-S2RD5を樹立した。ATDC5-S2RD5を利用してBMP2によるII型コラーゲンの転写制御がSMAD経路よりもp38やJNKなどのMAPKシグナルを主に介していることを明らかにした。ATDC5-S2RD5とレトロウィルス発現cDNAライブラリーを組み合わせて、発現クローニングを行いSOX6およびII型コラーゲン誘導能を持つ新規軟骨分化誘導因子SNX19を同定した。SOXトリオの上流分子を直接同定するためヒトマウスエンブリオのcDNAを用いた5 'RACE法によりSOX6のエンブリオニックプロモーター及びプロモーター内最小エンハンサー配列CES6を同定し、CES6をベイトにしたサウスウェスタンスクリーニングにてSOX6の上流分子でありかつSOX9の転写共役因子である核内分子GNL3を同定した。またSOX9と協調してII型コラーゲン遺伝子の転写を活性化する転写因子としてRUNX1-3までのRUNX family遺伝子とGATA5を同定した。