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2005 Fiscal Year Annual Research Report

酵素の低温適応戦略

Research Project

Project/Area Number 16550150
Research InstitutionKansai University

Principal Investigator

老川 典夫  関西大学, 工学部, 助教授 (80233005)

Keywordsアルコールデヒドロゲナーゼ / Flavobacterium / 耐熱性酵素 / 好冷性酵素 / 耐冷菌
Research Abstract

南極海洋性細菌Flavobacterium frigidimaris KUC-1のアルコールデヒドロゲナーゼ(FlaADH,EC 1.1.1.1)は耐熱性酵素にもかかわらず,好冷性酵素の特徴である低温条件下での高い反応効率(k_<cat>/K_m)と低い活性化エネルギーをあわせ持つ。本研究では,FlaADHのX線結晶構造解析を行うとともに,得られた立体構造に基づき各種変異酵素を調製し,本酵素の特性を解明することを目的としている。まずFlaADHの変異酵素N265Vの温度依存性を解析した。アレニウスプロットから活性化エネルギーを算出したところ,親酵素では約46.8kJ/molであるのに対し,N265Vでは30℃を境に二相性を示し,5〜30℃では64.8kJ/mol,30〜60℃では32.5kJ/molであった。Geobacillus stearothermophilusの耐熱性アルコールデヒドロゲナーゼにおいてもこのように活性化エネルギーの二相性が確認されており,低温条件下では活性化エネルギーが高いという特徴が報告されている。またFlaADHのN265は他のアルコールデヒドロゲナーゼとは異なり,その側鎖の向きが大きく異なり主鎖のα-ヘリックスとは相互作用していない。したがってFlaADHではN265近傍のループ構造の柔軟性が大きく異なっていると考えられる。これらの結果から,N265はFlaADHの低温活性発現に大きな影響を及ぼすことが明らかとなった。

  • Research Products

    (3 results)

All 2005 Other

All Journal Article (3 results)

  • [Journal Article] Purification, characterization, and overexpression of psychrophilic and thermolabile malate dehydrogenase of a novel Antarctic psychrotolerant, Flavobacterium frigidimaris KUC-12005

    • Author(s)
      Tadao Oikawa
    • Journal Title

      Biosci.Biotechnol.Biochem. 69

      Pages: 2143-2154

    • Description
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [Journal Article] Flavobacterium frigidimaris sp.nov., isolated Antarctic Seawater2005

    • Author(s)
      Yuichi Nogi
    • Journal Title

      System.Appl.Microbiol. 28

      Pages: 310-315

  • [Journal Article] Alanine racemase of Alfalfa seedlings (Medicago sativa L.) : first evidence for the presence of amino acid racemase in plant

    • Author(s)
      Kazutoshi Ono
    • Journal Title

      Phytochemistry (印刷中)

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

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