2004 Fiscal Year Annual Research Report
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16590219
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
石井 聡 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (10300815)
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| Keywords | リゾフォスファチジン酸 / LPA / LPA4 / p2y9 / GPR23 / 受容体 |
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| Research Abstract |
データベースよりヒトLPA_4受容体(別名p2y9/GPR23)と相同性が高い(98.1%)マウスオルソログをPCRでクローニングした。このDNAを発現ベクターに組み込み、内在性LPA受容体を持たないRH7777細胞に一過性発現させた。この細胞を破砕後、超遠心により膜画分を調製した。この膜画分をトリチウムラベルした1-オレオイル-LPAと結合させ、今回得られたマウスオルソログがLPAと特異的に結合することを確認した(Kd=31.3nM, Bmax=59.5pmol/mgタンパク質)。
マウスLPA_4受容体mRNAの発現分布を解析するために、マウス各種臓器から抽出したポリ(A^+)RNAをノーザンハイブリダイゼーションで解析した。その結果、雄性生殖器の精巣ではほとんど発現が認められなかったのとは対照的に、卵巣、子宮、胎盤など雌性生殖器での発現が高いことが明らかになった。一方、発生期の脳に焦点を絞ってマウスLPA_4受容体mRNAの発現の時期的な変化をE12以降で調べたところ、E12での発現が最も高く、それ以降は日を追う毎に急激に発現レベルが低下しくことが明らかになった。
ペプチド抗原をもとにしてマウスLPA_4受容体に対するウサギポリクローナル抗体を作製した。これを用いて組織化学的解析を行う予定である。
LPA_4受容体欠損マウスを作製するためのターゲティングベクターを、マウスゲノムDNAのBACライブラリーをもとに作製した。現在、相同組換えを起こしたES細胞をスクリーニング中である。
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[Journal Article] Stimulation of erythrocyte ceramide formation by platelet activating factor.2005
Author(s)
Lang, P.A., Kempe, D.S., Tanneur, V., Eisele, K., Klarl, B.A., Myssina, S., Jendrossek, V., Ishii, S., Shimizu, T., Waidmann, M., Hessler, G., Huber, S.M., Lang, F., Wieder, T.
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Journal Title
J.Cell Sci. 118
Pages: 1233-1243
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[Journal Article] Platelet activating factor receptor deficient mice have an improved host defense against pneumococcal pneumonia.2004
Author(s)
Rijneveld, A.W., Weijer, S., Florquin, S., Speelman, P., Shimizu, T., Ishii, S., van der Poll, T.
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Journal Title
J.Infect.Dis. 189
Pages: 711-716
Description
「研究成果報告書概要(和文)」より
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[Journal Article] Dyslipidemia associated with atherosclerotic disease systemically alters dendritic cell mobilization.2004
Author(s)
Angeli, V., Llodra, J., Rong, J.X., Satoh, K., Ishii, S., Shimizu, T., Fisher, E.A., Randolph, G.J.
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Journal Title
Immunity 21
Pages: 561-574
Description
「研究成果報告書概要(和文)」より
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[Journal Article] Platelet-activating factor receptor deficient mice show an unaltered clearance of Haemophilus influenzae from their respiratory tract.2004
Author(s)
Branger, J., Wieland, C.W., Florquin, S., Maris, N.A., Pater, J.M., Speelman, P., Shimizu, T., Ishii, S., van der Poll, T.
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Journal Title
Description
「研究成果報告書概要(和文)」より
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[Journal Article] Platelet-activating factor receptor develops airway hyperresponsiveness independently of airway inflammation in a murine asthma model.2004
Author(s)
Ishii, S., Nagase, T., Shindou, H., Takizawa, H., Ouchi, Y., Shimizu, T.
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Journal Title
J.Immunol. 172
Pages: 7095-7102
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