2005 Fiscal Year Annual Research Report
腫瘍抗原の同定と抗原に対する宿主免疫反応動態の解析
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16590315
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
上中 明子 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 講師 (50273967)
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| Keywords | 癌 / エリスポットクローニング / トランスレーショナルリサーチ / モノクローナル抗体 / 細胞・組織 / 免疫モニタリング |
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| Research Abstract |
1.がん抗原の同定
培養肺癌細胞由来mRNAからcDNAライブラリーを作成し、10,000クローンを1プールとした40プールのライブラリーを作成し、第一次、2次のスクリーニングを完了。第3,第4次スクリーニングへ向けて、CTL側の調整を行っている。
2.抗原の特質解析ツールとしてのモノクローナル抗体の作出
がん・精巣抗原XAGE-1bに対するモノクローナル抗体USO9-13を、開発した簡易モノクローナル抗体作成法によって作出した。組織染色によりその反応特異性を明らかにした。さらにXAGE-1b蛋白の抗体が認識する領域を明らかにした。
3.がん免疫療法におけるT細胞免疫反応動態の解析
免疫療法における免疫反応動態の解析は重要であるが、がん抗原特異的に反応するT細胞の頻度は著しく低くその検出は困難である。そこで、T細胞免疫モニタリング法の検討および実際に使用可能な方法を検討した。
モデル抗原としてインフルエンザA-24ペプチドを用いて末梢血リンパ球を刺激し、培養条件およびのアッセイ法の検討を行った。その結果、5%プール血清、IL-2 10u/mlおよびIL-7 10ng/ml添加AIM-V培地で、12日間の刺激培養で抗原特異的T細胞が効率良く検出されることを明らかにした。また、がん抗原と特異的に反応するT細胞の検出法として、エリスポット法、細脚内IFNγ検出法、IFNγ分泌細胞検出法を比較検討し、IFNγ分泌細胞検出法が高感度に検出することを明らかにした。
CHP-NY-ESO-1蛋白の臨床試験におけるT細胞免疫反応動態をIFNγ分泌細胞検出法により解析した。末梢Tリンパ球をオーバーラップペプチドを用いて刺激し、再現性の高い結果が得られることを明らかにした。CD4 T細胞のモニタリングでは、4回の免疫で、約半数の症例に特異的T細胞の上昇をみとめた。CD8 T細胞モニタリングでは、4回の免疫では特異的T細胞の上昇を認めた症例はなかった。
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