2005 Fiscal Year Annual Research Report
アデニル酸シクラーゼサブタイプによる心機能調節とその選択的抑制薬による心不全治療
| Project/Area Number |
16590719
|
|---|
| Research Institution | Nippon Medical School |
|---|
Principal Investigator |
奥村 敏 日本医科大学, 医学部, 助手 (60233475)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石川 義弘 横浜市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (40305470)
佐藤 直樹 日本医科大学, 医学部, 講師 (70291721)
|
|---|
| Keywords | 5型アデニル酸シクラーゼ / ノックアウトマウス / イソプロテレノール / アポトーシス / Desensitization / アデニル酸シクラーゼアッセイ |
|---|
| Research Abstract |
ベータアドレナリン受容体(β-AR)シグナルへの慢性カテコラミン刺激で誘導されるDesensitizationに5型アデニル酸シクラーゼ(AC5)がはたす役割
[背景]平成16年度において我々は5型AC(AC5)がβ-ARの刺激で誘導されるアポトーシスを促進させる作用があることを5型ACノックアウトマウス(AC5KO)を用いて明らかにした。このことはAC5が心不全の発症を促進させる作用があることを示唆している。Desensitizationは慢性カテコラミン刺激により誘導されるアポトーシス、心不全発症に対して心保護作用があることが知られている。平成17年度では慢性カテコラミン刺激後に誘導されるDesensitizationにAC5がはたす役割について検討を行った。
[方法]ISO(30mg/kg/day)を含むOsmotic mini-pumpをAC5KOならびにwild-type (WT)の皮下に植え込み、一週間後に超音波を用いて心機能(EF ; Ejection fraction)を測定した。その後心臓を摘出しMembrane preparationを行い膜成分を調整してACアッセイとAC5の特異的抗体を用いたWestern Blootting (WB)を行ない、AC5KOとWTについてISO投与群と非投与群で比較検討を行った。
[結果]Basalの心機能はWTとAC5KOのいずれも正常心機能であった(EF ; WT vs. AC5KO 71±0.7% vs. 71±0.3%)。ISO投与後では、ISO刺激に対する心機能の上昇の程度はAC5KOではWTに比べて有為に低下していた(EF ; WT vs. AC5KO 82±0.7% vs. 79±1.0%)。次に摘出心から膜成分を調整してAC assayを行ったところ、ISO投与群ではWT、AC5KOのいずれの場合も非投与群に比べAC活性の低下を認めたが、その程度は有為にAC5KOで大きかった。またWT群を用いてAC5の特異的抗体を用いたWBの結果からISO投与後のAC5の発現量は大変興味深いことにWTでは非投与群に比べて有為に亢進していた。以上の結果は慢性カテコラミン刺激後に生じるDesensitizationはWTに比べてAC5KOでより効果的に生じること、さらにはDesensitizationがβ-ARのみならずACレベルでも生じており、AC5はDesensitizationの形成に抑制的に作用していることを示唆している
|
