2004 Fiscal Year Annual Research Report
新規FLT3キナーゼ阻害剤の臨床応用へ向けた基盤的研究と評価モデルマウスの作製
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16590932
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
清井 仁 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (90314004)
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| Keywords | FLT3 / 白血病 / 分子標的療法 / チロシンキナーゼ / 阻害剤 |
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| Research Abstract |
我々は変異FLT3発現細胞株に対する増殖抑制効果を指標にしたハイスループットスクリーニングにより、数十nMのIC_<50>値を示す新規FLT3キナーゼ阻害剤を見出した。本年度は、この薬剤の白血病治療におけるproof of principleを確認すべく基礎的検討を行い、下記の結果を得た。
1.変異FLT3発現ヒト白血病細胞株、各種タイプの変異FLT3発現32D細胞ならびに、正常FLT3とFL共発現により恒常的に正常FLT3分子が活性化している32D細胞を用いて、FLT3下流で活性化している分子への効果を検討したところ、FLT3分子の脱リン酸化に対応して、STAT5、MAPK、AKTの脱リン酸化を認めた。また、各種細胞株における検討より、STAT5のリン酸化レベルが阻害剤感受性を予測するサロゲートマーカーの候補であることが示された。
2.各種タイプの変異FLT3発現32D細胞を同系のC3Hマウスに静注することにより、約7日目には白血病の全身性浸潤を認め、2週間以内には全例死亡したが、これら白血病発症マウスに、静注後10日目より薬剤の投与を2週間行うと治癒が得られた。これらの結果により本剤はマウス白血病を治癒に導くことが可能であり、POPは確認された。現在、薬剤安定性、血中濃度維持、副作用の点において詳細に検討を加えており、更なる構造展開も行っている。
3.細胞株、マウス白血病に対するPOPが得られたことから、白血病臨床検体を用いた阻害効果をMTT法ならびに、コロニー形態で検討した。MTT法では、基礎実験で得られた結果と同等レベルでの増殖抑制効果が得られた。また、正常骨髄細胞に対するコロニー形成の阻害には、白血病細胞コロニー形成阻害の100倍以上の濃度が必要であり、正常造血に対する影響が少ないことが示唆された。
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