二分脊椎高感受性マウスを用いた催奇性薬剤のスクリーニング法の開発に関する研究

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16591026
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 酒井 規夫 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (30314313)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 沖永 剛志 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (30362734) ; 谷池 雅子 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (30263289) ; 大薗 惠一 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (20270770)
• Keywords: 二分脊椎 / Lrp6 / Wntシグナル / pQCT / 葉酸

Research Abstract

本年は最終年度にあたり、二分脊椎の解析とともにそのメカニズムに関する研究を行った。
1)新生仔の表現型の解析;rsのホモrs/rsの二分脊椎の見られた個体については、骨格標本を作製し、Alcian blue染色、Alizarin染色を行い、軟骨および骨化異常について解析し、rsのホモマウスにおいて骨化遅延を見いだした。またrs/rsマウスにおける骨代謝異常をさらに詳細に検討するため、pQCTによる経時的な骨量評価に加えて、骨形態計測を行った。pQCTにおいて、若年期から老齢期までのrs/rsの脛骨において、雄性、雌性ともに海綿骨密度及び皮質骨断面積の低下を認めた。rs/rsにおいて単位骨量及び海綿骨数が減少する傾向を示し、吸収面及び破骨細胞数が増加する傾向を示した。7週齢マウス由来の骨芽細胞の増殖及び石灰化を検討したところ、rs/rsと野生型の間に明らかな差を認めなかった。また7週齢マウス由来の骨芽細胞では、定量PCRにおいて、Ranklの発現がrs/rsにおいて野生型に比し増加していた。Opgの発現は明らかな差を認めなかった。
2)葉酸による予防効果の解析;rsの交配により、胎児においてrs/rsが産まれるようにしておき、この妊娠マウスに葉酸を3日間腹腔内投与(3mg/kg/day)を行ったが、明らかな発現率の変化は認められなかった。また、二分脊椎の観察方法において、軽度の症状のものに関しては観察方法の確立が必要であると考えられた。今後、葉酸の投与量、投与期間などについて検討する必要があると考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Novel mutation of gene coding for glial fibrillary acidic protein in a Japanese patient with Alexander disease (2006)
  • Author(s): Kawai M, Sakai N, Miyake S, Tsukamoto H, Akagi M, Inui K, Mushiake S, Taniike M, Ozono K.
  • Journal Title: Brain Dev 28(6) Pages: 60-62
• [Journal Article] Related Articles, Links, Renal cell carcinoma in a pediatric patient with an inherited mitochondrial mutation (2005)
  • Author(s): Sangkhathat S, Kusafuka T, Yoneda, A, Kuroda S, Tanaka M, Sakai N, Fukuzawa M.
  • Journal Title: Pediatr Sure Int 21(9) Pages: 745-748
• [Journal Article] Enzyme replacement therapy in Japanese Fabry disease patients : the results of phase 2 bridging study (2005)
  • Author(s): Eto Y, Ohashi T, Utsunomiya Y, Fujiwara M, Mizuno A, Inui K, Sakai N, Kitagawa T, Suzuki Y, Mochizuki S, Kawakami M, Hosoya T, Owada M, Sakuraba H, Saito H.
  • Journal Title: J Inherit Metab Dis 28(4) Pages: 575-583
• [Journal Article] Roberts syndrome is caused by mutations in ESCO2, a human homolog of yeast ECO1 that is essential for the establishment of sister chromatid cohesion (2005)
  • Author(s): Vega H, Waisfisz Q, Gordillo M, Sakai N, Yanagihara I, Yamada M, van Gosliga D, Kayserili H, Xu C, Ozono K, Jabs EW, Inui K, Joenie H.
  • Journal Title: Nat Genet 37(5) Pages: 468-470
• [Journal Article] Six novel mutations detected in GALC gene in 17 Japanese patients with Krabbe disease and new genotype-phenotype correlation
  • Author(s): Xu C, Sakai N, Taniike M, Inui, Ozono K
  • Journal Title: J Hum Genet in press
• [Journal Article] Characterization of the sensitivity of lymphoblastoid cell lines to various stress agents in Roberts syndrome
  • Author(s): Gordillo M, Vega H, Sakai N.Tsukamoto H, Ozono K, Inui K
  • Journal Title: Med J Osaka Univ in press