2004 Fiscal Year Annual Research Report
体内遺伝子の動態をリアルタイムで観るジーンイメージングの開発
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16591225
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
中村 佳代子 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (20124480)
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| Keywords | アンチセンス / Tc-99m / mdr / 多剤耐性 / オリゴヌクレオチド / ジーンイメージング |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、細胞内の特定の遺伝子がどこにどれだけ存在するか、又、体内に挿入した遺伝子がどのように移動してどこへ到着するかを、非侵襲的にリアルタイムで観察する核医学的手法、『ジーンイメージング』を開発することである。すなわち、多剤耐性遺伝子のひとつmdrをモデルとして用い、mdrアンチセンスを放射性核種のTc-99mにて標識して、mdrを過剰に存在する多剤耐性の腫瘍組織を遺伝子レベルで画像診断するジーンイメージング方法を確立する。
研究は腫瘍細胞とこれを植え付けたマウスをモデルとして用いて遂行した。腫瘍細胞としては、ヒト類上皮癌細胞のKB-31を親株として、これにmdr 1をトランスフェクトしたmdr過剰細胞;KB-G2、抗がん剤の投与で多剤耐性ができた患者から樹立した細胞;TCO-1を用いた。
(1)Tc-99m-標識アンチセンス(オリゴヌクレオチド修飾体A)とTc-99m-標識スクランブルセンス(オリゴヌクレオチド修飾体C)とを、それぞれ、mdr陽性細胞;KB-G2とTCO-1、mdr陰性細胞;KB-31とを相互にインキュベートして、細胞への集積程度を評価し、in vitroでのアンチセンス(特異的)集積を確認した。(J.Nucl Medに発表)
(2)KB-31とKB-G2腫瘍細胞をマウスに植え付け、Tc-99m-標識アンチセンス、または、Tc-99m-標識センスを腫瘍に直接投与して、in vivoでのアンチセンスイメージングに成功した。
(3)(2)と同様のマウスに、Tc-99m-標識アンチセンス、または、Tc-99m-標識センスを静脈内に投与して、In vivoでのオリゴヌクレオチドの動態を検討し、アンチセンスの腫瘍への特異的集積を確認した。((2)と(3)を併せて、Bioconjugate Chemistryに発表)
オリゴヌクレオチドのTc-99m標識に関して海外共同研究者のD.Hnatowich氏の協力と指導を受けた。
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