2005 Fiscal Year Annual Research Report

コンドロモジュリンI遺伝子導入による腫瘍血管新生阻害の試み

Research Project

Project/Area Number	16591295
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	大塚将之千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (90334185)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	宮崎勝千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (70166156) 伊藤博千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (00232463) 清水宏明千葉大学, 大学院医学研究院, 講師 (80272318) 加藤厚千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (70344984) 黒澤永千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (10375678)
Keywords	コンドロモジュリン-I / 血管新生 / 遺伝子導入 / mTOR / ラパマイシン / リンパ管新生
Research Abstract	1.血管新生抑制因子コンドロモジュリン-Iの遺伝子導入による腫瘍血管新生阻害の試み昨年度に引き続きコンドロモジュリン-I発現ベクターをアデノウイルス及びさまざまなリポゾームを用いて作製し、そのベクターをin vitroにおいて、CT-26細胞にトランスフェクションして遺伝子導入を行い、その発現動態(発現強度・発現期間)をreal-time PCR法にて検討しつつ、その後の実験に最も効率のよいベクターを選択している。また、それとともに、マウス担癌モデルを作製し、in vivoの実験、コンドロモジュリン-Iによる腫瘍組織成長抑制効果、microvessel densityの抑制効果についての検討している。 2.mTORを標的とした腫瘍血管新生阻害に関する研究昨年度に引き続きCT-26細胞、Walker 256 carcinosarcoma細胞、AR42J-B13細胞、ヒト臍帯静脈内皮細胞を用い、in vitroにおいてラパマイシンを濃度を変えて付加することにより、その増殖抑制効果を評価している。また、それぞれの細胞におけるVEGF・angiopoietins・Tie-2・FLK-1といった血管新生関連分子の発現がラパマイシンを加えた時にどのように変化しているかをreal-time PCR法及びELISA法・Western blot法により検討している。比較的低容量のラパマイシン投与によっても、腫瘍細胞におけるVEGF-Aの発現は低下し、腫瘍増殖抑制効果がみられているが、それに加えリンパ管新生に関与すると考えられているVEGF-Cの発現低下も見いだしている。