2004 Fiscal Year Annual Research Report
低密度培養にて単離増殖させた滑膜組織幹細胞による再建前十字靭帯の治癒促進法
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16591477
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
宗田 大 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (50190864)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
関矢 一郎 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (10345291)
高久田 和夫 東京医科歯科大学, 生体材料工学研究所, 教授 (70108223)
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| Keywords | 滑膜幹細胞 / 治癒促進 / 腱移植術 / 前十字靱帯再建術 / 細胞移植術 / 組織学的検討 / 生体力学的検討 |
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| Research Abstract |
実験1:滑膜幹細胞による移植腱骨移行部の治癒促進法
方法:12週令雄SDラットの膝関節から滑膜組織を採取し、collagenase処理して接着細胞を2週後に回収した。細胞は蛍光色素DiIを用いて標識し、アテロコラーゲンゲルを細胞を含んだ同量の培地と混合した。移植腱としてアキレス腱を採取し骨孔から引き出し、脛骨上で骨孔の3mm遠位部のスクリューに縫合した。間質性幹細胞移植群(M群)では細胞を含んだアテロコラーゲンゲルを骨孔内に満たした。術後1週、2週で組織学的検討と蛍光顕微鏡を用い細胞の動態を追跡した。
結果:組織学的検討ではM群の1週ではC群より成熟が進んでいる傾向が認めた。蛍光顕微鏡による観察では骨孔、接触面に注入した細胞が残存していることが認められた。M群の2週では境界の組織の成熟がより進み、蛍光顕微鏡による観察では1週のものと同様、骨孔、接触面に注入した細胞が残存していた。
実験2:滑膜幹細胞によるIn situ freezingした膝前十字靱帯(ACL)の治癒促進法
方法:実験1同様に滑膜細胞を採取し、片側膝関節を切開し、液体窒素を用いて家兎ACLをin situで凍結処理し、ACL内の線維芽細胞を完全に死滅させた。I群はcontrolとして凍結処理のみを行い、II群には凍結処理を後、細胞含有アテロコラーゲンゲルをACL周囲に投与した(gel群)。2、4、8、12週後に屠殺し、HE染色による組織学的検討と蛍光顕微鏡いよる移植細胞動態を検討した。
結果:術後2週、gel群においてはACL遠位脛骨付着部付近に滑膜被覆を認め、被覆滑膜組織内にDiI陽性細胞を認めた。術後4週ではgel群では中央部にも滑膜被覆を認め一部ACL実質内での細胞浸潤および血管新生を認めた。gel群では被覆滑膜組織内に少数DiI陽性細胞を認めた。蛍光顕微鏡による観察ではgel群では12週までDiI陽性細胞の同定が可能だったが浸潤細胞には認めなかった。
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Research Products
(6 results)
