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2005 Fiscal Year Annual Research Report

エピジェネティクスからみた生殖補助技術の配偶子・受精卵ゲノムへの影響解析

Research Project

Project/Area Number 16591635
Research InstitutionJUNTENDO UNIVERSITY

Principal Investigator

荒木 慶彦  順天堂大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (70250933)

Keywordsエピジェネティクス / DNAメチル化 / 体外受精 / 雌性生殖管 / 生殖細胞
Research Abstract

近年、組織特異的な分子発現における転写調節にはゲノムDNAの化学修飾、即ちエピジェネティクな変化が重要な役割を果たすことが明らかになってきている。また遺伝子のエピジェネティクな変化は、環境因子を含めた後天的な諸要因で容易に影響され得ることから、臨床医学的にもこの遺伝子の変化と生活習慣病や難治性疾患との関連が注目され始めている。本研究では、受精・初期発生における雌性生殖管内の機能分子の生体内の働きを追求する事を最終目的とし、その前段階として、現時点で行われている配偶子・受精卵体外培養技術がそれらの細胞に与えるエピジェネティクな影響を、特にCpGアイランドのメチル化を指標にして生体内(卵管内)の環境との比較し得るか検討した。RLGS法によるCpGアイランドのメチル化、特に組織依存的にメチル化される領域(T-DMR)のマッピングは、C57B1/6マウスで詳細な検討がなされている為、初期胚発生に関与するT-DMRのデータベースよりプライマー設定し、PCR法を用いて生殖細胞のゲノムの増幅条件設定を試みた。一匹のマウスより得られる卵は自然排卵では排卵処理を行わないと10-20個しか回収されない為、これら実験の確実な遂行のためのアガロースビーズ法によるsingle cell PCR法の確立を目指した。この結果、微小細胞サンプルからのゲノムDNAの調整及びPCR検出については、100個/2μlの試料を用いてのPCR法を確立した。100個/2μl以下の微小サンプルにおいては、nested PCRを行う必要があり、プライマー選択の重要性が示唆された。これらの結果はCpGアイランドのメチル化を検出するためにはマウス一群を5-10匹に設定することでデータを得られると思われ、in vivoとin vitroにおける生殖細胞、特に卵を評価する方法として有用と思われる。

  • Research Products

    (4 results)

All 2006 2005

All Journal Article (4 results)

  • [Journal Article] Epididymis-specific promoter-driven gene targeting : A transcription factor which regulates epididymis-specific gene expression.2006

    • Author(s)
      Suzuki K., et al.
    • Journal Title

      Molecular and Cellular Endocrinology (In press)

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] Sexually dimorphic expression of the novel germ cell antigen TEX101 during mouse gonad development.2005

    • Author(s)
      Takayama T., et al.
    • Journal Title

      Biology of Reproduction 72

      Pages: 1315-1323

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] Inhibition of cell spreading and stress fiber formation in CHO cells transfected with cDNA of a glycosylphosphatidylinositol-anchored glycoprotein, GPI-80.2005

    • Author(s)
      Anzai-Takeda Y., et al.
    • Journal Title

      Immunobiology 210

      Pages: 1-10

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] TEX101 is shed from the cell surface of sperm located in the caput epididymidis of the mouse.2005

    • Author(s)
      Takayama T., et al.
    • Journal Title

      Zygote 13

      Pages: 325-333

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

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